川芎嗪对大鼠脊髓损伤模型GAP-43和Survivin表达的影响
发布时间:2017-07-25 16:24
本文关键词:川芎嗪对大鼠脊髓损伤模型GAP-43和Survivin表达的影响
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【摘要】:目的:通过改良Allen's法建立SD大鼠脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)模型,观察川芎嗪治疗组对大鼠损伤模型的GAP-43和Survivin表达的影响,进一步探讨川芎嗪治疗脊髓损伤的可能机制。 方法:选取健康的成年SD大鼠共72只,雌雄不限,鼠龄约10周,体重约250-270g。随机分为假手术组(sham operation group S组,n=12)、生理盐水对照组(normal saline control groupN组,n=30)、川芎嗪治疗组(tetramethylpyrazine treatment group T组,n=30)。然后按术后大鼠处死时间再分为1d、3d、7d、14d、21d、28d六个亚组,在每个亚组中S组2只大鼠,N组和T组各5只大鼠,N组和T组采用改良Allen's法建立SD大鼠T10节段脊髓损伤模型,S组只咬除椎板,不打击,不给药物;T组术后30分钟予以川芎嗪注射剂腹腔给药(200mg/Kg),每日一次,共用药5日;N组同等剂量的生理盐水腹腔注射,给药时间同T组,于术后1d、3d、7d、14d、21d、28d六个时间点分别对相应大鼠进行BBB评分,评价大鼠脊髓的运动功能恢复情况;然后处死相应大鼠,获取损伤脊髓标本,进行HE染色以及GAP-43、Survivin免疫组化染色,记录免疫阳性细胞数,结果用SPSS16.0进行统计学分析。 结果:1.BBB评分:BBB评分T组在第1天和第3天时间点与N组相比,无统计学意义(P0.05);而在第7天、第14天、第21天、第28的时间点T组BBB评分高于N组BBB评分,差异有统计学意义(P0.05),其中在第7天和第21天的时间点差异具有显著统计学意义(P0.01)。2.GAP-43表达:S组几乎没有GAP-43阳性细胞表达。各个时间点N组和T组可见明显阳性细胞结构,GAP-43在损伤后1天即可观察到明显表达,在14天达到高峰,28天仍有表达。T组分别在第3天、第7天、第14天及第21天的时间点GAP-43阳性细胞数高于N组GAP-43阳性细胞数,差异有统计学意义(P0.05),其中第7天、第14天、第21天的时间点差异有显著统计学意义(P0.01)。3.Survivin表达:S组Survivin阳性表达不明显。各个时间点的N组及T组可见明显的Survivin阳性细胞。Survivin在脊髓损伤后的1天也有明显表达,7天达到高峰,28天仍可见有表达。T组在第1天、第3天、第7天和第14天的时间点Suvivin的阳细胞数高于N组Suvivin的阳细胞数,差异有统计学意义(P0.05),其中在第1天和第3天两时间点有显著性统计学意义(P0.01)。 结论:1.川芎嗪能够促进脊髓损伤后的运动功能恢复;2.川芎嗪能够促进脊髓损伤后GAP-43及Suvivin表达的上调,川芎嗪对脊髓损伤后神经功能的恢复的促进作用可能与此机制有关。
【关键词】:脊髓损伤(SCI) BBB评分 川芎嗪(TMP) 神经生长相关蛋白-43(GAP-43) Survivin
【学位授予单位】:中南大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R-332;R651.2
【目录】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 英文缩写对照表10-11
- 前言11-14
- 第一章 材料与方法14-22
- 1.1 实验分组14
- 1.2 实验设备14-15
- 1.3 实验试剂15
- 1.4 实验步骤15-21
- 1.4.1 SD大鼠脊髓损伤模型的建立15-16
- 1.4.2 大鼠的饲养和术后护理16
- 1.4.3 BBB评分16-18
- 1.4.4 动物取材步骤18
- 1.4.5 石蜡切片制作步骤18-19
- 1.4.6 HE染色步骤19-20
- 1.4.7 免疫组化步骤20-21
- 1.4.8 免疫组化结果计数21
- 1.5 统计学处理21-22
- 第二章 结果与分析22-26
- 2.1 一般行为观察22
- 2.2 BBB评分22-23
- 2.3 组织学观察23
- 2.4 免疫组化GAP-43测定23-24
- 2.5 免疫组化Survivin测定24-26
- 第三章 讨论26-32
- 3.1 脊髓损伤模型的建立26-27
- 3.2 行为学评分27-28
- 3.3 GAP-43与脊髓损伤28-29
- 3.4 Survivin与脊髓损伤29-30
- 3.5 川芎嗪与脊髓损伤30-31
- 3.6 问题与展望31-32
- 结论32-33
- 附图33-37
- 参考文献37-40
- 综述40-55
- 参考文献51-55
- 致谢55
【参考文献】
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,本文编号:572199
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