体外共培养大鼠骨髓间充质干细胞对牙囊细胞增殖、成骨分化影响的早期研究

发布时间：2017-07-25 21:16

  本文关键词：体外共培养大鼠骨髓间充质干细胞对牙囊细胞增殖、成骨分化影响的早期研究

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【摘要】：目的： 构建大鼠牙囊细胞（dental follicle cells, DFCs）、骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells, BMSCs）体外共培养模型，初步研究与大鼠BMSCs共培养对DFCs增殖、成骨分化的影响。 方法： 1.大鼠DFCs、BMSCs的体外分离、培养和鉴定。 2.模型构建与分组。采用0.4um孔径Transwell小室构建大鼠DFCs、BMSCs体外共培养模型。共培养组：DFCs接种于Transwell小室配套孔板，BMSCs接种于Transwell小室，建立上下双层细胞共培养模型；对照组：仅将DFCs接种于Transwell小室配套孔板，单独培养。 3.DFCs增殖活力检测。采用Transwell小室（24孔板规格）构建共培养模型，每组4个复孔，于共培养后第1、3、5、7天应用CCK-8检测法对DFCs增殖活力进行检测。 4.DFCs ALP活性检测。采用Transwell小室（24孔板规格）构建共培养模型，每组6个复孔，于共培养后第7、14天对DFCs进行ALP活性检测。 5.FQ-PCR检测DFCs成骨基因表达。采用Transwell小室（12孔板规格）构建共培养模型，，每组6个复孔，共培养10天对DFCs成骨基因OCN、COL-I、BSP、Runx2进行基因检测，并计算其相对表达量。 结果： 1.成功制取、鉴定大鼠DFCs、BMSCs。 2.DFCs增殖活力检测结果：与对照组相比，与BMSCs共培养后第1天，DFCs增殖活力未见明显变化，第3天DFCs增殖活力开始增强；第5天、7天共培养组DFCs增殖活力单独培养组DFC（sP0.05）。 3.DFCs ALP活性检测结果：共培养第7天、14天，共培养组DFCsALP活性均单独培养组DFCs（P0.05）。 4.FQ-PCR检测DFCs成骨基因表达：与BMSCs共培养10天，共培养组OCN、COL-I、BSP、Runx2基因相对表达量均对照组（P0.05）。 结论： 与BMSCs共培养可以增强DFCs增殖活力、ALP活性，及上调成骨基因OCN、COL-I、BSP、Runx2表达。DFCs、BMSCs复合培养在牙周组织缺损修复再生研究中具有潜在的应用价值。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 牙囊细胞 共培养 细胞增殖 成骨分化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照6-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-16
• 第一部分 大鼠 DFCs 和 BMSCs 的分离、培养及鉴定16-28
• 第一节 大鼠 DFCs 的分离、培养及鉴定16-23
• 1 材料和方法16-19
• 2 结果19-21
• 3 讨论21-22
• 4 小结22-23
• 第二节 大鼠 BMSCs 分离、培养及鉴定23-28
• 1 材料和方法23-25
• 2 结果25-27
• 3 讨论27
• 4 小结27-28
• 第二部分 体外共培养大鼠 BMSCs 对 DFCs 增殖活力的影响28-32
• 1 材料与方法28-30
• 2 结果30
• 3 讨论30-31
• 4 小结31-32
• 第三部分 体外共培养 BMSCs 对 DFCs 成骨分化的影响32-42
• 第一节 体外共培养大鼠 BMSCs 对 DFCsALP 活性的影响33-35
• 1 材料与方法33-34
• 2 结果34
• 3 讨论34-35
• 4 小结35
• 第二节 体外共培养大鼠 BMSCs 对 DFCs 成骨基因表达的影响35-42
• 1 材料与方法35-39
• 2 结果39-40
• 3 讨论40-41
• 4 小结41-42
• 全文总结42-43
• 参考文献43-49
• 文献综述49-57
• 参考文献53-57
• 致谢57-58
• 攻读硕士学位期间发表的论文58-59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 叶国;董伟;陈宇;吴亚菲;;牙囊细胞在牙周组织工程中的应用前景[J];国际口腔医学杂志;2006年06期

2 凌均h

本文编号：573306