5-氨基酮戊酸光动力（ALA-PDT）对白念珠菌作用的研究

发布时间：2017-07-26 00:01

  本文关键词：5-氨基酮戊酸光动力（ALA-PDT）对白念珠菌作用的研究

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【摘要】：目的： 1、研究ALA在白念珠菌体内转化为PpⅨ的荧光药代动力学，为ALA在其体内进行光动力作用的前提条件提供可靠依据。 2、研究不同孵育时间下ALA-PDT对白念珠菌的抗菌效应，确定其杀菌能力，探讨白念珠菌病治疗的最佳敷药时间。 3、观察ALA-PDT对白念株菌细胞超微结构的影响，为研究ALA-PDT抗菌的作用机制提供理论基础。 4、测定ALA-PDT作用后的白念珠菌对氟康唑的MIC值，为光动力疗法与氟康唑联合治疗白念珠菌病提供理论依据。 方法： 1、利用激光共聚焦显微镜检测白念珠菌体内PpⅨ产生情况。 2、平板菌落计数法测定不同孵育时间下ALA-PDT作用后菌落形成单位数。 3、利用透射电镜观察ALA-PDT对白念珠菌细胞超微结构的影响。 4、微量稀释法检测ALA-PDT作用前后的白念珠菌对氟康唑MIC值的差异。 结果： 1、100mmol/L ALA与菌液37℃避光孵育30min后，在激光共聚焦显微镜下可见砖红色荧光物质PpⅨ生成。 2、各孵育时间点ALA-PDT作用后的菌落数不同，其中孵育时间为30min的菌落数比其它各孵育时间点的菌落数均低，差异有统计学意义（P0.01）；此外，菌液单纯加ALA或单纯照光后的菌落数与生长对照组的菌落数之间差异无统计学意义（P=1.000）。 3、透射电镜下，ALA-PDT作用后的白念珠菌细胞肿胀变形，细胞壁、细胞膜结构不完整，细胞壁疏松，，细胞膜与细胞壁之间间隙大小不一，部分细胞可见细胞壁棉絮状致密外层或细胞膜局灶性缺失的现象。 4、微量稀释法检测各组酵母细胞对氟康唑MIC值：ALA-PDT作用后的实验株：0.125ug/ml，未经ALA-PDT作用的对照株：1ug/ml。 结论： 1、白念珠菌能很好地吸收ALA并在体内转化为砖红色荧光PpⅨ。 2、ALA-PDT对白念珠菌有杀伤作用，且在菌液与ALA孵育30min后，该作用最明显。菌液单纯与ALA孵育或单纯照光均不能对其产生杀伤作用。 3、ALA-PDT通过破坏白念珠菌的细胞壁和细胞膜而影响菌株的生物活性。 4、ALA-PDT作用后的白念珠菌对氟康唑的敏感性提高，这可能为光动力疗法与氟康唑联合运用进行高效、低毒抗真菌治疗提供理论依据。
【关键词】：ALA-PDT 白念珠菌 PpⅨ 平板菌落计数法 药敏实验
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R379.4
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-15
• 材料与方法15-23
• 结果23-28
• 讨论28-33
• 小结33-34
• 参考文献34-39
• 致谢39-40
• 综述40-46
• 参考文献45-46

【参考文献】

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本文编号：573830