JNK激酶途径调控BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化

发布时间：2017-07-26 14:11

  本文关键词：JNK激酶途径调控BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化

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【摘要】：目的：前期研究发现骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein，BMP9)有较强的诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSCs)向成骨分化的潜力，但是其具体的作用机制还不甚清楚。本课题旨在确认丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases，MAPKs）中的JNK（c-Jun N-terminal kinases）激酶途径对BMP9诱导间充质干细胞成骨分化的调控作用及其相关分子机制。 方法：利用重组腺病毒将BMP9导入间充质干细胞C3H10T1/2、MEF、C2C12，通过Western印迹和荧光素酶报告基因检测JNK的磷酸化水平；利用JNK特异性抑制剂SP600125和RNA干扰技术抑制JNK活性后，以碱性磷酸酶(ALP)活性测定分析早期成骨指标ALP的变化，利用茜素红S检测钙盐沉积；通过RT-PCR检测成骨相关转录因子RUNX2和成骨靶基因ID1、ID2、ID3、Col1的表达；通过Western印迹和荧光素酶报告基因检测Smad1/5/8的活性；通过免疫细胞化学检测OCN和OPN的表达；动物实验验证在RNA沉默JNK蛋白激酶后，对BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2异位成骨的影响。 结果：BMP9可以增强JNK激酶的磷酸化；利用JNK抑制剂SP600125抑制JNK激酶活性后，BMP9诱导的间充质干细胞的早期成骨指标ALP活性以及晚期指标钙盐沉积、OCN和OPN的表达均受到抑制，而且经典Smad1/5/8的活化也受到抑制。同时，成骨相关转录因子RUNX2和成骨靶基因ID1、ID2、ID3、Col1的表达也相应受到抑制；RNA干扰沉默JNK基因表达后，同样也抑制了BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的ALP活性、钙盐沉积和裸鼠皮下异位成骨。 结论：总之，我们的结果表明，BMP9可活化JNK激酶途径，而且JNK活性受到抑制后，，BMP9诱导的间充质干细胞的成骨分化也受到抑制，表明BMP9可活化JNK激酶途径从而诱导间充质干细胞向成骨分化。
【关键词】：骨形态发生蛋白9(BMP9) 间充质干细胞（MSCs） JNK激酶 成骨分化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 英汉缩略对照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 第一部分 JNK 激酶途径对 BMP9 诱导的间充质干细胞成骨分化的调控12-28
• 1 材料与方法12-17
• 2 结果17-25
• 3 讨论25-28
• 第二部分 BMP9 经 JNK 激酶途径调控间充质干细胞成骨分化的初步作用机制28-35
• 1 材料与方法28-31
• 2 结果31-33
• 3 讨论33-35
• 全文总结35-36
• 参考文献36-39
• 文献综述39-47
• 参考文献44-47
• 致谢47-48
• 攻读硕士期间发表的学术论文48-49

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 徐静;赵丹;王箭;王文娟;罗进勇;;骨形态发生蛋白9通过JNKs激酶途径调控间充质干细胞成骨分化[J];生物化学与生物物理进展;2013年12期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 田刚;BMP-2在降钙素基因相关肽调控MG63细胞增殖分化中的作用[D];第三军医大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 黄晓丹;质子泵抑制剂对骨折愈合影响的基础研究[D];河北医科大学;2013年

2 闫欣;正畸牙齿移动过程中Follistatin在牙周组织中表达的动物实验研究[D];大连医科大学;2012年

本文编号：576781