朝藿定C诱导C3H小鼠胚胎间充质干细胞向内皮样细胞分化的研究

发布时间：2017-07-30 04:22

  本文关键词：朝藿定C诱导C3H小鼠胚胎间充质干细胞向内皮样细胞分化的研究

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【摘要】：目的研究朝藿定C(Epimedin C)诱导C3H小鼠胚胎间充质干细胞(murine embryonic mesenchymal stem cells,C3H/10T1/2)内皮样分化作用。方法体外培养C3H/10T1/2细胞,MTT法和结晶紫法检测不同浓度下朝藿定C对细胞的毒性作用;显微镜下观察朝藿定C诱导后的细胞形态变化;采用流式细胞仪检测朝藿定C对细胞周期分布的影响;采用半定量PCR检测血管内皮细胞标志物CD31、CD34、血管内皮细胞锌指1(vascular endothelial zinc finger 1,Vezf1)、血管生成素1(angiopoietin 1,Ang1)、血管生成素2(angiopoietin 2,Ang2)mRNA的表达;采用免疫细胞化学染色法检测血小板内皮黏附分子-1(platelet-endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)、细胞外-5'-核苷酸酶(ecto-5'-nucleotidase,CD73)、内皮细胞特异性分子-1(endothelial cell specific molecule-1,ESM-1)、整合素β5(integrinβ5)的表达。结果朝藿定C在浓度1~30μmol/L时,不影响C3H/10T1/2细胞的存活率。30μmol/L处理24 h后,对细胞周期无明显影响。朝藿定C能诱导C3H/10T1/2细胞向血管内皮细胞分化,使细胞呈明显漩涡状排列。PCR检测结果显示,与干预前比较,经诱导5天后的C3H/10T1/2细胞血管内皮细胞标志因子、CD34、Vezf1、Ang1、Ang2 mRNA水平明显增加(P0.05,P0.01);细胞免疫化学染色结果显示诱导5天后的C3H/10T1/2细胞血管内皮细胞标志性蛋白CD31、CD73、ESM-1均呈阳性表达,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论朝藿定C能诱导C3H/10T1/2细胞向血管内皮样细胞分化。
【作者单位】： 浙江中医药大学药物研究所;温州医科大学中药研究院;
【关键词】： 朝藿定C 胚胎间充质干细胞 诱导分化 内皮样细胞
【基金】：国家自然科学海外合作项目(No.81228024) 国家自然科学基金青年项目(No.81302989)
【分类号】：R329
【正文快照】： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是多能干细胞,来源于发育早期的中胚层和外胚层。在特定的诱导条件下,MSCs在体内或体外可分化为多种组织细胞,如脂肪[1]、骨[2]、软骨[3]、神经[4]、上皮[5]、心肌、内皮[6]等,其多向分化潜能在连续传代培养和冷冻保存后仍被保留,被

【参考文献】

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本文编号：592517