小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法研究

发布时间：2017-07-31 18:38

  本文关键词：小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法研究

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【摘要】：目的:建立小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法。方法:从7~8周龄的C57BL/6J小鼠唾液腺分离唾液腺干细胞,采用悬浮唾液球法培养唾液腺干细胞,应用倒置显微镜动态观察细胞形态;细胞计数观察细胞生长状况;免疫荧光检测LN(层连蛋白)的表达。结果:倒置显微镜下,接种2 d后细胞(salispheres)小聚集体明显增加;接种4 d后唾液腺球直径逐渐增大,形成直径约100μm的神经球,球周围无明显刺突,存在明显细胞聚集。接种7 d后唾液腺球周围存在较多微刺,10 d后球继续增长,形状明显不同于4 d,表明处于活跃的增殖状态,唾液腺干细胞已经开始分化。生长曲线结果显示随着培养天数的增加,唾液腺球的数目呈明显递增趋势,同时,唾液腺球的直径也明显增大。免疫荧光结果显示,培养2 d后,唾液干细胞球开始表达LN,培养第4 d后,随着唾液干细胞球的增加,层连蛋白表达更明显。结论:应用该方法获得了唾液腺干细胞,具有成体干细胞的特征,具有自我更新和多向分化的潜能。
【作者单位】： 南华大学药学与生物科学学院;南华大学附属第二医院检验科;
【关键词】： 小鼠唾液腺干细胞 细胞分离培养 悬浮唾液球 层连蛋白
【基金】：国家自然科学基金项目(81400117) 中国博士后基金项目(2014M562115) 湖南省自然科学基金项目(2015JJ4042) 南华大学归国人员科研启动基金项目(2014XQD46)
【分类号】：R329
【正文快照】： Chinese Library Classification(CLC):Q95-3;Q593 Document code:AArticle ID:1673-6273(2015)32-6230-04前言成体干细胞存在于成年动物的许多组织和器官中,其在组织的修复和再生过程中起着关键的作用。成体干细胞是指在已分化组织中,具有自我更新和多向分化潜能的未分化细胞

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本文编号：600553