小鼠主要组织相容性复合物移植抗原肽的提取与验证

发布时间：2017-08-01 04:16

  本文关键词：小鼠主要组织相容性复合物移植抗原肽的提取与验证

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【摘要】：目的建立主要组织相容性复合物(MHC)移植抗原肽提取方法。方法以供体C57BL/6小鼠脾细胞为移植抗原免疫BALB/c受体小鼠,用p H3.3柠檬酸缓冲液洗脱受体小鼠脾细胞MHC结合抗原肽,用BCA蛋白测定法和高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)检测洗脱液中多肽成分,以小鼠异位心脏移植验证洗脱液内多肽的移植免疫抗原性。结果弱酸洗脱获得了微量多肽50μg/108脾细胞,其中含有混杂短多肽。与同系移植组相比,HPLC-MS/MS检测发现同种异体移植组洗脱液中出现差异多肽。同系MHC移植抗原肽预致敏受体心脏移植物中位存活时间为8 d,同种异体MHC移植抗原肽预致敏受体心脏移植物中位存活时间仅4 d。用同种异体来源的MHC移植抗原肽预致敏受体,使小鼠心脏移植物中位存活时间显著缩短。结论通过供体脾细胞免疫,弱酸洗脱受体脾细胞可获得MHC移植抗原肽,可用于进一步筛选移植抗原决定簇。
【作者单位】： 第四军医大学附属西京医院肝胆外科暨器官移植中心;
【关键词】： 移植免疫 抗原 抗原决定簇 T淋巴细胞 主要组织相容性复合物
【基金】：陕西省科学技术研究发展计划项目(2011K12-01-06)
【分类号】：R392
【正文快照】： 移植排斥反应本质上是受体免疫系统对移植物抗原的特异性免疫应答,T细胞免疫应答是其主要机制[1-2]。以8~16个氨基酸为核心的抗原决定簇代表了细胞免疫中抗原的“特异性”,是产生T细胞免疫应答的根源[3-4]。抗原决定簇的鉴定是一个复杂的系统工程,提取移植抗原肽是分离鉴定移

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本文编号：602450