ERK5信号通路在髓核细胞退变的作用研究

发布时间：2017-08-04 22:04

  本文关键词：ERK5信号通路在髓核细胞退变的作用研究

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【摘要】：目的：探索髓核细胞中ERK5信号通路的作用，，是否能为退变椎间盘提供潜在的分子治疗途径。 方法：1、从正常椎间盘组织分离髓核细胞，应用免疫组化及免疫荧光的方法检测ERK5及P-ERK5在髓核细胞的表达，XTT法检测不同浓度的BIX02188对髓核细胞的细胞毒性；2、髓核细胞分组给予不同浓度的BIX02188抑制2小时后，加入H2O2刺激5分钟，Westernblot检测P-ERK5的表达；3、髓核细胞分组：5μM BIX0218组和空白对照组，48小时后RT-PCR检测Ⅱ型胶原，糖胺多糖，SOX9基因mRNA的表达；4、髓核细胞分组：5μMBIX0218组和空白对照组，48小时后ELISA法检测IL-6、NO、MMP-3、TIMP-1的表达。 结果：1、ERK-5、P-ERK5在髓核细胞的细胞核及胞浆均有表达，10μM以下的BIX02188无细胞毒性；2、200μM的H2O2能激活髓核细胞P-ERK5的表达，BIX02188浓度在3-10μM刺激髓核细胞能抑制髓核细胞P-ERK5的表达；3、抑制髓核细胞ERK5信号通路48小时后Ⅱ型胶原，糖胺多糖，SOX9表达明显降低，与空白对照组相比较差异有统计学意义(n=5,P0.05)；4、抑制髓核细胞ERK5信号通路48小时后NO、IL-6、MMP3表达增高，与空白对照组相比较差异有统计学意义(n=5,P0.05)，TIMP-1无明显变化。 结论：1、ERK5及P-ERK5在髓核细胞的胞核及胞浆中均有表达；2、抑制ERK5信号通路后，髓核细胞Ⅱ型胶原，糖胺多糖，SOX9基因表达降低；NO、IL-6、MMP3表达升高，TIMP-1无明显变化。
【关键词】：髓核细胞 细胞外调节信号激酶5(ERK5) BIX02188 椎间盘
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 前言8-13
• 第一部分 髓核细胞的分离，免疫组化检测 ERK5 及 P-ERK5 在髓核细胞的表达，XTT 检测 BIX02188 的细胞毒性13-19
• 材料与方法13-19
• 1.1、实验材料13-15
• 1.2、实验方法15-17
• 1.3、实验结果17-19
• 第二部分 不同浓度的抑制剂 BIX02188 对髓核细胞 ERK5 的影响19-25
• 材料与方法19-25
• 2.1 、实验材料19-21
• 2.2 、实验方法21-24
• 2.3 、实验结果24-25
• 第三部分 抑制 ERK5 的激活，髓核细胞Ⅱ型胶原，糖胺多糖和 SOX9 的基因转录水平的检测25-29
• 材料与方法25-29
• 3.1 、实验材料25-26
• 3.2 、实验方法26-28
• 3.3 、实验结果28-29
• 第四部分 抑制 ERK5 的激活，髓核细胞细胞外液中 NO、IL-6、MMP-3、TIMP-1 的检测29-37
• 材料与方法29-37
• 4.1 、实验材料29-32
• 4.2 、实验方法32-34
• 4.3 、实验结果34-37
• 讨论37-40
• 结论40-41
• 参考文献41-47
• 附录47-49
• 缩略词表49-50
• 在校期间发表论文50-51
• 致谢51

【参考文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 邢孟永;P-p38MAPK和Ⅱ型胶原在退变腰椎间盘组织中表达的实验研究[D];大理学院;2012年

2 程勇军;SOX9基因与人颈椎间盘退变相关性的初步研究[D];第二军医大学;2012年

本文编号：621920