重组9型腺相关病毒载体转染动脉粥样硬化模型小鼠主动脉:最佳在体表达时间点的确定

发布时间：2017-08-08 01:11

  本文关键词：重组9型腺相关病毒载体转染动脉粥样硬化模型小鼠主动脉:最佳在体表达时间点的确定

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【摘要】：背景:重组9型腺相关病毒载体对心肌组织具有较高的亲和力,关于携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的重组9型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 9-enhanced green fluorescent protein,r AAV9-e GFP)在动脉粥样硬化模型小鼠主动脉中的表达情况还不确定。目的:探索携带r AAV9-e GFP转染动脉粥样硬化模型小鼠主动脉最佳的在体表达时间点。方法:给予30只Apo E-/-小鼠连续高脂饮食饲养16周建立为动脉粥样硬化模型,然后随机取其中25只通过尾静脉注射转染5.0×1011 vg(virus genomes)r AAV9-e GFP,另5只作为对照组给予生理盐水。转染病毒的动脉粥样硬化模型小鼠分别于转染后14,21,28,35,60 d处死,留取主动脉组织,应用激光共聚焦显微镜观察增强型绿色荧光蛋白荧光表达情况,Western blot法检测主动脉增强型绿色荧光蛋白的蛋白表达,观察增强型绿色荧光蛋白体内表达情况,确定病毒在体表达最佳时间点。结果与结论:r AAV9-e GFP可有效转染动脉粥样硬化模型小鼠主动脉血管,增强型绿色荧光蛋白可在主动脉组织中表达,其表达强度随着转染时间的增加而逐渐增强,于转染35 d时表达最强,60 d趋于稳定,各时间点主动脉斑块中增强型绿色荧光蛋白表达的水平差异有显著意义(P0.001)。表明r AAV9-e GFP可有效在动脉粥样硬化模型Apo E-/-小鼠主动脉中表达,r AAV9-e GFP可成为动脉粥样硬化治疗的最佳载体。
【作者单位】： 新疆医科大学第一附属医院心脏中心;
【关键词】： 病毒 绿色荧光蛋白质类 模型 动物 动脉粥样硬化 实验动物 心脏及血管损伤模型 组织构建 型腺相关病毒 主动脉 转染 Apo E-/-小鼠 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金项目(81160042)~~
【分类号】：R543.5;R-332
【正文快照】： 南省西平县人,汉族,新疆医科大学在读硕士,主要从事冠状动脉粥样硬化性心脏病基础及临床方面的研究。通讯作者:杨毅宁,博士,主任医师,教授,博士生导师,新疆医科大学第一附属医院心脏中心,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市8300542015.05.014[http://www.crter.org](2015)05-00733-06

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 刘剑刚;董国菊;史大卓;王永炎;;载脂蛋白E基因敲除小鼠不同周龄动脉粥样硬化的病理变化[J];中国动脉硬化杂志;2005年06期

2 程军;李金平;田卓;胡厚源;;ApoE基因敲除小鼠和C57BL/6J小鼠血脂及主动脉组织病理学的对比观察[J];实验动物科学;2008年02期

3 高霞;马依彤;杨毅宁;向阳;陈邦党;刘芬;杜雷;;9型重组腺相关病毒转染体外培养大鼠心肌细胞的影响[J];细胞与分子免疫学杂志;2010年01期

4 杜雷;马依彤;杨毅宁;向阳;陈邦党;刘芬;高霞;;9型重组腺相关病毒转染大鼠心脏成纤维细胞的体外研究[J];心血管康复医学杂志;2010年02期

5 康爱君;田枫;张阔;周淑佩;郑振辉;;载脂蛋白E基因缺陷(C57BL/6J-ApoE)小鼠血脂及病理组织学观察[J];中国比较医学杂志;2006年02期

6 周军;周丽;曾庆仁;;高脂饮食诱导APOE和LDLR基因敲除鼠AS斑块形成的分子病理学特征[J];中国现代医学杂志;2009年10期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 余洁;赵景宏;邓梦扬;黄岚;;尿毒症加速性动脉粥样硬化模型的建立和评价[J];第三军医大学学报;2009年19期

2 卢冠军;杨安宁;蔡欣;哈丽娜;杨晓玲;姜怡邓;;Hcy对动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢的影响[J];重庆医学;2014年30期

3 魏静元;王歆睿;孙晶;;ApoCⅢ转基因小型猪的分子水平鉴定[J];分子科学学报;2014年05期

4 谢谨捷;杨娅;;基因敲除鼠在动脉粥样硬化研究中的应用[J];基础医学与临床;2008年04期

5 朱卫浩;张书余;田颖;罗斌;王宝鉴;;热浪对ApoE基因缺陷小鼠ET-1、NO及体温的影响[J];科学技术与工程;2013年16期

6 Shicong ZHANG;Xiangqun LIU;Huanqin CHEN;Xin YU;Qiongqiong GU;Min WANG;Xingpo LI;;Effects of Baicalin on the NF-κB and ACE2 Protein Expression in Atherosclerosis of ApoE-/-Mice Induced by Hyperlipaemia[J];Medicinal Plant;2013年08期

7 郭杨志;杨惠民;姜洋;王志勇;杜娟;;调脂通脉颗粒对ApoE基因敲除小鼠血脂及sICAM-1、sVCAM-1的影响[J];辽宁中医杂志;2014年03期

8 姜洋;杨惠民;;补肾祛痰化瘀法对载脂蛋白E基因敲除小鼠氧化应激水平的影响研究[J];环球中医药;2014年05期

9 李勇;王强;杨大春;;替米沙坦对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的作用及机制[J];中华实用诊断与治疗杂志;2015年01期

10 王敏;李先平;赵立玲;曹虹;梁好;唐爱国;罗湘杭;;载脂蛋白E基因缺陷小鼠血液生化指标的变化[J];中国全科医学;2010年24期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 陈可冀;史大卓;徐浩;刘剑刚;;动脉粥样硬化防治技术平台及中药干预作用的系统研究[A];全国中西医结合发展战略研讨会暨中国中西医结合学会成立三十周年纪念会论文汇编[C];2011年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 向阳;老龄小鼠急性心肌梗塞后心脏破裂心室重构的分子机制及NF-κB的靶向干预研究[D];新疆医科大学;2010年

2 金裕范;不同产地、加工工艺及储存年限普洱茶化学成分和药理活性的比较研究[D];北京中医药大学;2012年

3 刘春玲;芦黄颗粒抗动脉内膜损伤术后兔动脉粥样硬化的实验研究[D];南京中医药大学;2006年

4 秦彦文;PPARs在不同周龄ApoE-/-小鼠心肌的表达及他汀干预的机制研究~1[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年

5 余洁;Klotho基因干预尿毒症加速性动脉粥样硬化的实验研究[D];第三军医大学;2010年

6 张国侠;莱菔子水溶性生物碱对ApoE~（-/-）小鼠血管内皮保护机制的实验研究[D];长春中医药大学;2010年

7 杨琼;microRNA-21在大鼠心肌缺血再灌注早期的抗凋亡作用及机制[D];中南大学;2013年

8 刘威武;三重靶向CRAd.pE-Smac联合X射线照射对MDA-MB-231细胞的体外杀伤作用[D];吉林大学;2013年

9 陈睿婷;重组白介素12慢病毒的构建及感染皮瓣主要细胞的实验研究[D];北京协和医学院;2010年

10 姜洋;补肾祛瘀化痰法对轻度认知功能损害患者认知功能及氧化应激影响的研究[D];北京中医药大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李先平;载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）小鼠骨代谢的变化及其机制的初步研究[D];中南大学;2009年

2 樊继波;三氧化二砷白蛋白纳米球的制备及其对膀胱癌细胞杀伤作用的研究[D];广西医科大学;2010年

3 徐杰;不同剂量阿托伐他汀治疗颈动脉粥样硬化症的疗效观察[D];郑州大学;2012年

4 曾细阳;软脉灵口服液对实验性动脉粥样硬化斑块内血管新生的影响[D];福建医科大学;2012年

5 姚杰;前列腺癌抗原-1在前列腺癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系[D];郑州大学;2013年

6 徐晓霞;AAV9-SERCA2a基因不同方法转染SD大鼠心肌持效性及安全性评价[D];新疆医科大学;2013年

7 沈鑫;FrzA基因靶向转导干预老龄缺血性心力衰竭的研究[D];新疆医科大学;2013年

8 巩慧慧;脂肪酸结合蛋白4在高同型半胱氨酸血症致ApoE~(-/-)鼠动脉粥样硬化的作用研究[D];宁夏医科大学;2013年

9 姚永钊;腺相关病毒介导血小板源性生长因子治疗急性心肌梗死的实验研究[D];新疆医科大学;2013年

10 查克岚;槲皮素对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成及SDF-1/CXCR4表达的影响研究[D];泸州医学院;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 颜伟,胡厚源,周林,周向东,何国祥;两种LXR激动剂对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化影响的对照研究[J];第三军医大学学报;2005年05期

2 郑钧丰;孔永;葛良鹏;魏泓;;2种腺相关病毒介导的增强型绿色荧光蛋白对人成纤维细胞转染效率的研究[J];第三军医大学学报;2008年12期

3 汤明芳;陆晓和;高基民;钟彦彦;罗微;周明乾;;1型重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因转染人脐静脉内皮细胞的体外研究[J];南方医科大学学报;2008年05期

4 唐志红,夏敏,马静,凌文华;载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉壁胆固醇含量的测定及意义[J];疾病控制杂志;2004年03期

5 张春妮,汪俊军,庄一义,刘小传,强宏娟,陈大宁;脂蛋白对巨噬细胞的作用研究进展[J];中国动脉硬化杂志;2005年02期

6 范乐明;动脉粥样硬化炎症机制的再认识[J];中国动脉硬化杂志;2005年03期

7 刘龙涛,张文高,郑广娟;载脂蛋白E基因敲除小鼠在动脉粥样硬化研究中的应用[J];山东生物医学工程;2002年04期

8 汪进益;范慧敏;刘中民;卢蓉;马亮;李杨;;大鼠心肌成纤维细胞体外培养的生物学特性及转基因研究[J];上海医学;2008年05期

9 王胜军;马洁;马斌;毛朝明;仝佳;杨敏;邵启祥;许化溪;;小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年08期

10 刘雪梅,吴符火;几类高脂血症动物模型的比较[J];中西医结合学报;2004年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘海燕;袁洪;;腺相关病毒在心脏基因转导中的应用[J];中国药物经济学;2012年04期

2 曹勇;熊维宁;徐永健;张珍祥;高宝安;陆俊羽;;白细胞介素4反义基因腺相关病毒载体质粒的构建及鉴定[J];华中科技大学学报(医学版);2006年02期

3 孙杰;潘志强;朱跃良;周田华;;构建人端粒酶反转录酶基因腺相关病毒2载体在人髓核细胞的表达[J];中国组织工程研究;2014年15期

4 张湘燕;;腺相关病毒感染途径的实时单分子成像分析[J];国外医学(微生物学分册);2002年05期

5 朱蓓;李燕;吴剑卿;赵卫红;;腺相关病毒载体介导造血干/祖细胞的基因转导[J];国际遗传学杂志;2007年06期

6 朱海红,陈智,章明太,姚航平,丁列明;腺相关病毒和人γ-干扰素基因重组体转染淋巴细胞的研究[J];中华传染病杂志;2000年02期

7 陈立,陈浩明,李戈,姚纪花,卢大儒,薛京伦;一种新型的低辅毒污染的重组AAV生产系统[J];科学通报;2003年01期

8 梁春敏,钟翠平,郑宁,吴欣,孙瑞霞,刘银坤,叶胜龙;小鼠次级淋巴组织趋化因子成熟肽基因/腺相关病毒重组载体的构建[J];解剖学报;2004年02期

9 卫静;袁发焕;候卫平;李芙蓉;黄云剑;;转染腺相关病毒对骨髓间充质干细胞分化潜能的影响[J];现代生物医学进展;2008年06期

10 李剑涛;利用昆虫病毒系统生产表达胰岛素的腺相关病毒[J];北华大学学报(自然科学版);2005年05期

中国重要会议论文全文数据库 前8条

1 张W，

本文编号：637559