抗发热伴血小板减少综合征病毒结构蛋白单克隆抗体的制备和功能分析

发布时间：2017-08-09 15:29

  本文关键词：抗发热伴血小板减少综合征病毒结构蛋白单克隆抗体的制备和功能分析

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【摘要】：为制备抗发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)结构蛋白的单克隆抗体,本研究用灭活纯化的SFTSV病毒颗粒免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得分别分泌抗糖蛋白单抗和核蛋白单抗的杂交瘤细胞株。用免疫荧光法和免疫沉淀方法对制备的单克隆抗体的抗原特异性进行鉴定,并初步进行单抗效价、中和活性及亲和力等功能分析。结果显示,通过细胞融合和克隆化,共筛选出13株稳定分泌抗糖蛋白(Glycoprotein,GP)单抗和7株稳定分泌抗核蛋白(Nucleoprotein,NP)单抗的杂交瘤细胞株。免疫荧光和免疫沉淀鉴定显示获得的单抗有良好的抗原特异性。抗GP单抗中6株针对Gn,7株针对Gc,大部分的间接免疫荧光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)滴度在1 280~20 480之间,其中4株抗Gn单抗具有中和活性。获得的7株抗NP单抗均与NP特异性结合,IFA滴度范围在5 120~20 480,均无中和活性。此外,经非竞争ELISA检测的两株抗GP单抗(1C8和1G8)均有较高亲和力。本研究为SFTS诊断方法的发展及SFTSV致病机制研究奠定了基础。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室;
【关键词】： 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV) 核蛋白(NP) 糖蛋白(GP) 单克隆抗体
【基金】：“重大新药创制”科技重大专项:发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒灭活疫苗的研制(2013ZX09102029) 国家自然科学基金:SFTS布尼亚病毒转录调控元件的鉴定及功能研究(31270201)
【分类号】：R392;R373
【正文快照】： 发热伴血小板减少综合征(Sever fever withthrombocytopenia syndrome,SFTS)是我国首次发现和命名的具有重要公共卫生意义的新发传染病。临床表现主要为急性发热伴血小板和白细胞减少,常伴有胃肠道症状,神经症状,多功能脏器损伤等症状。目前已确定该新发传染病病原为布尼亚病

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本文编号：646009