CHO-K1细胞簇集法检测百日咳毒素毒性的优化及验证

发布时间：2017-08-16 20:34

  本文关键词：CHO-K1细胞簇集法检测百日咳毒素毒性的优化及验证

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【摘要】：目的对CHO-K1细胞簇集法检测百日咳毒素(pertussis toxin,PT)毒性进行优化及验证。方法以国家PT标准品为参考品,将PT标准品倍比稀释后与CHO-K1细胞混合培养,显微镜观察PT能引起CHO-K1细胞簇集的程度。对细胞浓度、孵育时间进行优化,并对方法的特异性、敏感度、重复性进行验证。结果方法的最佳细胞浓度为2.5×105个/ml,最佳孵育时间为24 h。只有PT活性成分能使CHO-K1细胞发生簇集,最低检测限为10 pg/ml;2名试验员6次检测结果表明,该方法重复性良好。结论 CHO-K1细胞簇集法可及时、准确地检测出生产过程中PT含量,适用于百日咳发酵过程监测。
【作者单位】： 浙江卫信生物药业有限公司;
【关键词】： CHO-K细胞 百日咳毒素 簇集
【分类号】：R378.42
【正文快照】： 百日咳疫苗是通过培养百日咳杆菌,收集其产生的百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)等有效抗原成分制成的疫苗。在百日咳杆菌发酵培养过程中,PT会随着培养时间的增加而降解,为了获得较高含量的PT,需通过快捷、准确的方法对PT含量进行

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 侯启明,张路民,梁雅文,秦进才;应用CHO细胞法检测百日咳疫苗中的残余毒性[J];中国生物制品学杂志;1997年02期

2 刘保奎,肖詹荣,付春晖,郭强,叶娟,唐巧英;无细胞百日咳疫苗中活性PT的保护作用[J];中国生物制品学杂志;2003年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 夏德菊;潘殊男;杨云凯;周第;金萧;王s，

本文编号：685431