26RFa在人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用

发布时间：2017-08-22 12:15

  本文关键词：26RFa在人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用

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【摘要】：目的：通过观察26RFa在成骨培养体系中对人骨髓间充质干细胞(Human Mesenchymal Stem Cells-bone marrow, HMSC-bm)增殖分化的影响,探讨26RFa在人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用。 方法：通过MTT实验,以此确定26RFa对HMSC-bm是否有促增殖作用及其起作用的最大活性浓度；将HMSC-bm接种于6孔培养板上,共接种6板(其中2板预置盖玻片),每板细胞都分为实验组和对照组。实验组含有10-11mol/L的26RFa,对照组不含26RFa；成骨细胞鉴定：取成骨诱导8天、12天、16天细胞各1板,用ALP试剂盒测定细胞上清液碱性磷酸酶活性；成骨诱导21天、28天后取预置盖玻片的2板细胞,行茜素红染色和Von Kossa染色,计算每张玻片钙结节数。Western blot检测cbfal(core binding factor al)的表达。 结果：成骨诱导8天、12天、16天后细胞内碱性磷酸酶活性测定,实验组高于对照组(P0.05,P0.01,P0.05)；21天、28天后茜素红染色和Von Kossa矿化结节数,实验组均高于对照组。实验组细胞cbfal表达明显高于对照组(p0.05)。 结论：在适宜的培养条件下,26RFa可促进人骨髓间充质干细胞增殖并向成骨细胞分化。
【关键词】：人骨髓间充质干细胞 26RFa 分化 成骨细胞 碱性磷酸酶 cbfal
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-7
• 第一章 前言7-11
• 第二章 材料与方法11-27
• 1 材料11-15
• 1.1 细胞来源11
• 1.2 主要试剂11-12
• 1.3 主要器材、仪器及材料12-15
• 2 方法15-26
• 2.1 细胞培养的相关试剂配制16-18
• 2.2 细胞复苏、培养及冻存18-20
• 2.3 细胞准备20
• 2.4 MTT法检测26RFa的最大活性浓度20
• 2.5 成骨诱导及实验分组20
• 2.6 茜素红染色20-21
• 2.7 Von Kossa染色21
• 2.8 碱性磷酸酶活性测定21-22
• 2.9 采用Western blot技术检测cbfal蛋白的表达22-26
• 3 统计学处理26-27
• 第三章 结果27-32
• 1 人骨髓间充质干细胞形态学观察27
• 2 MTT法测26RFa的最大活性浓度27-28
• 3 茜素红染色后矿化结节比较28-29
• 4 Von Kossa染色矿化结节比较29-30
• 5 碱性磷酸酶活性测定30
• 6 Western blot检测人骨髓间充质干细胞cbfal表达的变化30-32
• 第四章 讨论32-35
• 第五章 结论35-36
• 1 主要结论35
• 2 局限性与展望35-36
• 2.1 局限性35
• 2.2 展望35-36
• 第六章 参考文献36-40
• 综述40-54
• 参考文献50-54
• 缩略词表54-56
• 在学期间研究成果56-57
• 致谢57-58
• 附录 细胞鉴定证明书58

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：719093