少量人外周血体外培养鉴定单核细胞来源树突状细胞方法初探

发布时间：2017-08-25 16:31

  本文关键词：少量人外周血体外培养鉴定单核细胞来源树突状细胞方法初探

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【摘要】：目的:在少量人外周血条件下体外培养并鉴定单核细胞来源树突状细胞(Monocyte-derived dendritic cells,Mo DC)。方法:取健康成人少量新鲜外周血经改良密度梯度离心法分离获得单核细胞,加入重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rh GM-CSF)、重组人白细胞介素4(rh IL-4)诱导Mo DC生长,并用肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激成熟,倒置显微镜及扫描电镜观察细胞形态;分别于培养第4天和第7天用流式进行表型鉴定、CCK-8法检测同种异体混合淋巴细胞反应鉴定抗原递呈能力。结果:Mo DC呈类圆形,聚集成团,悬浮生长,扫描电镜观察其表面有典型毛刺状突起;流式检测Mo DC高表达CD11c、CD1a,经TNF-α刺激后的Mo DC表面MHCⅡ、CD80、CD83、CD86表达均较培养4 d的Mo DC明显升高,具有统计学意义(P0.05);经TNF-α刺激后的Mo DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力较培养4 d的Mo DC明显升高,具有统计学意义(P0.05)。结论:用本实验方法可从少量人外周血中获得成熟Mo DC,为其在多种变态反应疾病、自身免疫性疾病及肿瘤疫苗等领域的研究提供基础保障。
【作者单位】： 重庆医科大学附属儿童医院皮肤科 儿童发育疾病研究教育部重点实验室 儿科学重庆市重点实验室 重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地;
【关键词】： 树突状细胞 单核细胞来源树突状细胞 体外培养 流式细胞术
【基金】：重庆市科技计划项目(CSTC,2010BB5376)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 树突状细胞(Dendritic cells,DC)是已知的抗原递呈功能最强的细胞,能活化初始T细胞诱发适应性免疫应答。单核细胞来源的树突状细胞(Monocyte-derived dendritic cells,Mo DC)是单核细胞在炎症刺激环境下分化而来的非传统DC,能通过激活T细胞发挥效应抵抗炎症反应,还可诱导自身

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本文编号：737492