单增李斯特菌P60单克隆抗体的制备及初步应用

发布时间：2017-08-25 20:07

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【摘要】：目的制备并筛选单增李斯特菌P60特异性单克隆抗体,初步建立其快速检测方法。方法以体外表达并纯化的李斯特菌P60蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗李斯特菌P60的McAb,鉴定其抗体亚型,并对单抗的腹水效价、稳定性及亲和力进行分析。用纯化的单克隆抗体包被酶标板,结合生物素化处理的P60多克隆抗体,夹心ELISA筛选单增李斯特菌特异性单抗,并以重组P60为标准品,建立标准曲线。结果获得了4株可稳定分泌P60单克隆抗体的杂交瘤细胞株。ELISA检测表明,筛选的6C2单克隆抗体株可特异性与单增李斯特菌(4b)P60反应。结论建立的夹心ELISA方法可对单增李斯特菌进行特异性鉴别和定量检测。
【作者单位】： 天津市动物疫病预防控制中心;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室;兰州生物制品研究所有限责任公司;
【关键词】： 单增李斯特菌 P 单克隆抗体 鉴定 ELISA
【基金】：国家“十一五”科技支撑计划项目(No.2007BAD40B01)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocyto-genes,LM)简称单增李斯特菌,是一种能引起人兽共患的食源性致病菌。该菌属于细胞内寄生的革兰氏阳性杆菌,人畜感染后,主要表现为脑膜炎、败血症和血液中单核细胞增多等症状,死亡率达20%~30%[1]。该菌在自然界广泛存在,食品中存在的

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本文编号：738042