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兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用

发布时间:2017-08-27 11:04

  本文关键词:兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪干细胞的诱导分化作用


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【摘要】:目的探讨兔坐骨神经匀浆上清液对脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的诱导分化作用。方法取4月龄健康新西兰大白兔(体重2.0~2.5 kg)体外分离、培养ADSCs并传至第3代;用b FGF预诱导后,加入正常坐骨神经匀浆上清液(B组)及损伤3、7、14 d的坐骨神经匀浆上清液(分别为C、D、E组)对其进行诱导,空白对照组(A组)仅加入D-Hank液。观察细胞形态变化,并采用实时荧光定量PCR检测各组细胞神经组织蛋白(S-100)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)及巢蛋白(Nestin)基因表达,免疫细胞化学染色检测S-100蛋白表达。结果 C、D、E组细胞经诱导后逐渐出现雪旺细胞或神经细胞样形态改变,以D组变化最为明显;A、B组细胞形态未见明显改变,仍以梭形为主。S-100免疫细胞化学染色示,C、D、E组染色均为阳性,以D组阳性细胞最多;A、B组细胞无阳性表达。实时荧光定量PCR检测示,S-100基因表达量随损伤时间延长呈上升趋势,C、D组达高峰,之后缓慢下降;C、D组表达量显著高于A、B、E组(P0.05),C、D组间差异无统计学意义(P0.05)。NSE基因表达量呈相同趋势,D组达高峰,之后缓慢下降;D、E组表达量显著高于A、B、C组(P0.05),D、E组间差异亦有统计学意义(P0.05)。Nestin基因表达量各组间差异无统计学意义(P0.05)。结论兔损伤坐骨神经匀浆上清液在体外能够有效诱导ADSCs分化为雪旺细胞和神经细胞,伤后早期(3~7 d)可作为细胞移植的最佳时间。
【作者单位】: 天津市天津医院骨科研究所细胞工程室;
【关键词】脂肪来源干细胞 雪旺细胞 神经细胞 坐骨神经匀浆 诱导分化
【基金】:天津市卫生局科技基金资助项目(2011KZ57)~~
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,13.5 cm、1 500 r/min离心10 min;弃上清,D-HankADSCs)是一种具有多向分化潜能的成体干细胞,且液清洗1遍,用含10%FBS的L-DMEM培养基重悬,具有跨胚层分化能力,其数量大、易获得、体外扩增细胞计数板计数,调整细胞密度为4×104个/m L

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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4 任志午;赵U,

本文编号:745354


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