多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上检测BDV-P24蛋白质的应用

发布时间：2017-08-29 13:42

  本文关键词：多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上检测BDV-P24蛋白质的应用

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【摘要】：研究目的： 验证本课题组前期制备的多克隆及单克隆P24抗体能否在石蜡组织切片上检测博尔纳病病毒（Borna disease virus，BDV）磷蛋白（P24蛋白质）以及探索其运用的条件。 研究方法： 选择出生24h内的SD大鼠20只为实验组颅内注射BDV病毒液，对照组大鼠20只在相同部位注射磷酸盐缓冲液（Phosphate BufferedSaline，PBS），未经注射的SD大鼠和C57小鼠各40只作为阴性实验对照，饲养到60天取脑石蜡包埋制片；免疫组化染色用Envision两步法，，一抗为多克隆或单克隆P24抗体，以PBS代替一抗作为空白对照，P24抗体的稀释浓度分别从1:50、1:100、1:200、1:400、直到1:5000；以高倍镜下神经细胞细胞质呈棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，将每张切片阳性细胞比例评分乘以阳性强度评分计算总分。 结果： 多克隆P24和单克隆P24抗体分别在BDV感染大鼠实验组与阴性对照组的染色评分差异有统计学意义（多克隆抗体Z＝－3.108，P=0.000，而单克隆抗体Z＝－4.605，p=0.000）；在多克隆P24抗体稀释度中，1:200、1:400的敏感性好而背景着色较轻，在单克隆P24抗体稀释度中，1:100、1:200、1:400的敏感性好而无背景着色。 结论： 多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上能检测出BDV P24蛋白质；并且多克隆P24抗体推荐的浓度为1:200和1:400，单克隆P24抗体的推荐浓度为1:100、1:200和1:400。
【关键词】：多克隆P24抗体 单克隆P24抗体 博尔纳病病毒 免疫组化染色
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R392
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-14
• 2 结果14-16
• 3 讨论16-18
• 参考文献18-21
• 文献综述21-28
• 参考文献25-28
• 致谢28-29
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文29-30

【参考文献】

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1 徐晓艳;金戈;张亮;马丽华;李文娟;邓婧;黄荣忠;房亮;谢鹏;;抗博尔纳病病毒核蛋白多克隆抗体的制备和鉴定[J];中国微生态学杂志;2011年03期

本文编号：753609