脊髓缺血再灌注损伤腰动脉模型建立及丹参酮ⅡA作用研究

发布时间：2017-08-30 06:21

  本文关键词：脊髓缺血再灌注损伤腰动脉模型建立及丹参酮ⅡA作用研究

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【摘要】：目的： 1、应用血管铸型技术分析供应家兔脊髓组织的血管,夹闭家兔腰动脉建立脊髓缺血再灌注损伤模型,应用数字减影技术进行鉴定。 2、应用液质联用技术分析丹参酮ⅡA的药代动力学。 3、探讨丹参酮ⅡA对脊髓缺血再灌注损伤的作用以及其可能的机制。 方法： 1、实验动物与分组：新西兰家兔90只,雌雄不限,3个月月龄,体重为2.0±0.2kg,分为模型建立及鉴定组(n=12),丹参酮ⅡA药代动力学实验组(n=24),机制探讨组(n=54)。 2、模型建立及鉴定：首先选取2只家兔做血管铸型标本,分析血管走型,接着随机选择10只分为夹闭腹主动脉：和夹闭腰动脉,腹主动脉组沿左肾动脉下方夹闭腹主动脉、腰动脉组夹闭L3-6腰动脉,分别于夹闭前、夹闭中、松开血管夹时做数字减影,并于术后0.5小时取家兔脊髓,做HE染色,分析图片选取最佳动物模型。 3、丹参酮ⅡA药代动力学分析：随机分为0.5h组、1h组、4h组、8h组,各组6只家兔,首先各组均抽取空白脑脊液,然后沿耳缘静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠注射液,并与给药后0.5、1、4、8h再次抽取脑脊液,用液质联用技术检测脑脊液中丹参酮ⅡA的含量。 4、机制探讨：54只家兔随机分为假手术组6只,缺血组24只,丹参酮ⅡA组24只,假手术组只分离腰动脉,缺血组分离并夹闭腰动脉0.5h后松开动脉夹,丹参酮ⅡA组于术前0.5h沿耳缘静脉注射丹参酮ⅡA磺酸钠,分离并夹闭腰动脉0.5h后再次注射丹参酮ⅡA磺酸钠,以上各组在0.5、1、4、8h抽取血液后取L3-6段脊髓组织,抽取的血液加入含有抗凝剂的采血管中,用血液流变仪检测全血粘度、毛细管血浆粘度、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数、红细胞变形指数、红细胞电泳指数；同一只家兔的脊髓组织分为两段,一段固定于4%多聚甲醛中,用免疫组化定性检测NF-κβ、VCAM-1,另一段冻存于液氮中,用酶联免疫法定量检测VCAM-1的含量。 5、利用Spss16.0统计数据、图像处理系统分析处理图片。 结果： 1、成功的建立及鉴定了腰动脉夹闭脊髓缺血再灌注损伤模型。 2、给药后2h和7h的脑脊液与空白脑脊液相比较有差异,2h给药样品保留时间为8.92分钟,其分子量为399.2,7h给药样品保留时间为31.29分钟,其分子量为419。 3、脊髓缺血再灌注损伤后NF-κ β表达,同一时点免疫组化图片中丹参酮ⅡA组表达最少,缺血组中表达最高；脊髓缺血再灌注损伤后VCAM-1表达,假手术组相比,缺血组各时点VCAM-1表达显著升高,在0.5h、1h、4h时差异非常显著(p0.01),8h时具有差异性(p0.05)；此外,丹参酮ⅡA组与缺血组相比,0.5h显著降低(p0.01),1h、4h、8h时降低且具有差异性(p0.05)。假手术组始终无阳性血管表达,0.5h缺血组、丹参酮ⅡA组亦无阳性血管表达,1h、4h、8h缺血组阳性血管表达率最高,其中1h、4h中丹参酮ⅡA组与缺血组相比较差异显著(p0.05),8h差异非常显著(p0.01)；脊髓缺血再灌注损伤后血液流变学变化,缺血组各时点全血粘度在10s-1、60s-1、150s-1升高,毛细管血浆粘度升高(p0.05或p0.01)。丹参酮组各时点毛细管血浆粘度、红细胞聚集率、细胞刚性指数、变形指数降低极其显著(p0.01)。 结论： 1、夹闭腰动脉模型精确可靠、缺血完好、可操作性强、排除了其它脏器缺血导致的影响,因此该模型可以作为研究脊髓缺血再灌注损伤最佳模型,值得推广应用。 2、丹参酮ⅡA可以通过循环系统可以进入脊髓组织,从而达到保护脊髓组织的功能。 3、丹参酮工ⅡA减轻脊髓缺血再灌注损伤,可能是通过减少炎性因子NF-κβ、VCAM-1,改善血液流变学,达到保护脊髓组织的损伤。
【关键词】：家兔模型 缺血再灌注损伤 丹参酮ⅡA磺酸钠 核因子-κβ 血管细胞粘附分子-1 血液流变学
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 英汉~.略语名词对照5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 实验材料12-13
• 1 实验动物12
• 2 药物和试剂12
• 3 主要仪器和设备12-13
• 实验方法13-18
• 1 脊髓缺血再灌注损伤模型模型的建立及鉴定13-14
• 2 液质联用法测定脊髓缺血再灌注损伤中丹参酮ⅡA的含量14
• 3 脊髓缺血再灌注损伤脊髓组织中NF-κ β、VCAM-1、血液流变学检测14-17
• 4 统计学分析17-18
• 结果18-26
• 1 脊髓缺血再灌注损伤模型的建立及鉴定18-19
• 2 脊髓缺血再灌注损伤脑脊液中丹参酮ⅡA的含量19-22
• 3 丹参酮ⅡA在脊髓缺血再灌注损伤中的机制22-26
• 分析与讨论26-29
• 1 脊髓缺血再灌注损伤模型的建立与评价26
• 2 丹参酮ⅡA在脊髓缺血再灌注损伤中的药物代谢动力学26-27
• 3 丹参酮ⅡA在脊髓缺血再灌注损伤中的机制探讨27-29
• 结论29-30
• 参考文献30-33
• 致谢33-34
• 综述134-38
• 参考文献36-38
• 综述238-43
• 参考文献41-43
• 综述343-46
• 参考文献45-46
• 作者简历46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：757721