小鼠树突状细胞分泌的Exosome对同种异体T细胞增殖影响的实验研究
本文关键词:小鼠树突状细胞分泌的Exosome对同种异体T细胞增殖影响的实验研究
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【摘要】:目的:通过不同手段处理小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC),分别提取其分泌的Exosome,研究Exosome表型变化以及其对小鼠同种异体脾脏来源的T淋巴细胞增殖的影响,来寻找优化DC培养方案,探索DC源Exosome对T淋巴细胞的作用机制。 方法:首先检测并验证应用病原微生物产物LPS、抑炎因子IL-10、糖皮质激素地塞米松等手段对DC表面分子表达的影响;然后在以上实验基础上提取A:5天无处理组,B:7天无处理组,,C:7天LPS组,D:7天地塞米松组,E:7天IL-10组。提取不同培养条件下昆明小鼠骨髓源DC分泌的Exosome,用ICR小鼠(T cell+imDC)+昆明小鼠Exosome模拟混合淋巴细胞反应(MLR),CCK-8方法检测计算各组Exosome对同种异体T淋巴细胞的增殖抑制率。 结果:(1)DC表面分子MHC-II、CD80、CD86表达量变化比较如下:LPS组DC表面分子MHC-II、CD80、CD86表达量较其他组明显升高(P0.05)。(2)各组提取的Exosome表面分子表达量比较如下:MHC-II表达量B组分别与另外四组比较有统计学差异(P0.05),CD80表达量C组分别与A组、E组比较有显著统计学差异(P0.05),CD86表达量C组分别与A组、E组比较有统计学差异(P0.05)。各组提取的Exosome对T细胞增殖抑制率均为正值,各组之间比较均有统计学差异(P0.05),另外各组组内不同浓度比较亦均有统计学差异(P0.05)。 结论:(1)DC表面分子MHC-II、CD80及CD86表达量随着时间推移逐渐上调,是随时间逐渐走向成熟的过程;地塞米松及IL-10具有拮抗LPS促imDC成熟作用,降低DC表面MHC-II、CD80及CD86的表达量。(2)Exosome表面分子表达量与其来源细胞有关,不同处理组DC来源的Exosome其表面分子表达量不同。(3)各实验组提取的Exosome在imDC辅助下均有抑制T淋巴细胞增殖的作用,且5天无处理组、7天无处理组、7天地塞米松组、7天IL-10组Exosome对T淋巴细胞的增殖抑制率较7天LPS组明显高,并呈现浓度依赖性。各实验组中7天IL-10组抑制T淋巴细胞增殖效果最好。
【关键词】:小鼠 树突状细胞 Exosome T淋巴细胞增殖
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R392
【目录】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-12
- 材料和方法12-22
- 结果22-29
- 讨论29-37
- 结论37-38
- 参考文献38-43
- 综述43-50
- 参考文献47-50
- 攻读学位期间发表的论文50-51
- 致谢51-53
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本文编号:766243
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