低氧对人脐带间充质干细胞生物学特性及增殖的影响

发布时间：2017-09-05 12:01

  本文关键词：低氧对人脐带间充质干细胞生物学特性及增殖的影响

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【摘要】：目的探讨低氧培养对人脐带间充质干细胞的形态、免疫表型、分化潜能以及对细胞增殖和凋亡等的影响,为其今后在干细胞移植和组织细胞工程研究提供理论支持。 方法经父母授权同意后收取足月剖宫产新生儿脐带,采用酶消化法分离培养人脐带间充质干细胞,细胞贴壁法培养人脐带间充质干细胞。分别将细胞置入20%O2、10%O2和3%O2培养条件下培养,鉴定第7代人脐带间充质干细胞特性。将人脐带间充质干细胞行成骨和成脂诱导,通过茜素红和油红O染色检测人脐带间充质干细胞成骨分化和成脂分化潜能；流式细胞仪检测细胞表面标志物(CD105、CD73、 CD90、CD29、CD44、HLA-ABC、CD106、CD45、CD34、HLA-DR),观察细胞免疫表型的变化；细胞计数法绘制细胞生长曲线；流式细胞仪检测细胞周期；Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况。 结果本实验3%O2低氧培养的人脐带间充质干细胞具有成脂、成骨多向分化的潜能；人脐带间充质干细胞CD105、CD73、CD90、CD44、HLA-ABC呈高表达,CD106、CD29、CD45、CD34、HLA-DR低表达,提示低氧培养并不影响人脐带间充质干细胞的免疫表型。3%O2、10%02和20%O2氧浓度培养组,倍增时间分别为17.2小时、18.9小时和20.8小时,提示细胞增殖速度增快,且3%O2低氧培养组与20%O2氧浓度培养组比较有显著差异(P0.05)；3%O2低氧培养组与20%02氧浓度培养组比较,G0/1期细胞减少,S期细胞增多,增殖指数增高(P0.05)。3%O2培养组细胞凋亡率为(13.41%士1.39%),显著低于20%O2培养组(20.83%±1.81%),两组间差异显著(P0.05)。 结论3%O2低氧持续培养可促进人脐带间充质干细胞的增殖,减少细胞凋亡,并可保留其干细胞的特性。
【关键词】：人脐带间充质干细胞 低氧 细胞增殖 细胞凋亡
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 前言6-8
• 实验材料8-11
• 实验方法11-14
• 实验结果14-24
• 讨论24-27
• 结论27-28
• 参考文献28-31
• 英文缩略语31-32
• 综述32-45
• 参考文献40-45
• 致谢45-46
• 发表文章46-47

【参考文献】

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本文编号：797834