GM1联合生长因子诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究

发布时间：2017-10-08 10:10

  本文关键词：GM1联合生长因子诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的研究

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【摘要】：目的:探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialoteterahexosyl ganglioside,GM1)联合生长因子(bFGF+EGF)能否更为高效地促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为神经元样细胞,从而为细胞替代治疗缺血性脑卒中提供实验依据。方法:采用密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞,行原代、传代培养,取第3代BMSCs,用流式细胞术鉴定其表面标志物;同时鉴定其多分化潜能。将第3代BMSCs分四组向神经元样细胞诱导分化,A组:单用(bFGF+EGF);B组:单用GM1;C组:GM1联合(bFGF+EGF);D组:对照组。分别在正式诱导前后行免疫细胞化学法检测各组细胞Nestin、β-TubulinⅢ、GFAP的阳性表达率并行数据统计分析。结果:流式细胞术鉴定BMSCs表面标志物呈CD29(+)、CD105(+)、CD34(-)、CD45(-);同时其具分化为成骨细胞和成脂细胞潜能。BMSCs诱导为神经元样细胞之前,四组细胞Nestin、β-Tubulin、GFAP表达均呈阴性;诱导2~4 d时,A、B、C三组Nestin阳性细胞表达率均呈上升趋势,且C组高于A、B、D组;诱导6~8 d时,A、B、C三组Nestin阳性细胞表达率均有所降低,而β-TubulinⅢ、GFAP阳性细胞表达率则呈较明显上升趋势,且C组较A、B组升高明显。综合实验数据,C组Nestin、β-TubulinⅢ、GFAP阳性细胞表达率均高于A、B、D组。结论:GM1联合生长因子(bFGF+EGF)相比单独的生长因子(bFGF+EGF)或GM1,可更为高效地促进BMSCs诱导分化为神经元样细胞。
【作者单位】： 宁波市第二医院神经内科;宁波市第二医院干细胞研究室;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 GM 生长因子 诱导 神经元样细胞
【基金】：浙江省医学会临床科研基金(2013XYC-A73)
【分类号】：R329
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是一群能不断自我更新(复制)、分裂增殖,且具多谱系分化潜能的多能干细胞#1$。研究表明,BMSCs在特定诱导剂作用下能定向分化为神经元样细胞,包括神经干细胞、神经元和星形胶质细胞。因此,BMSCs可作为理想的种子细胞

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