Beclin1基因真核表达载体的构建、鉴定及在真核细胞内的表达

发布时间：2017-10-08 10:21

  本文关键词：Beclin1基因真核表达载体的构建、鉴定及在真核细胞内的表达

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【摘要】：目的构建Beclin1真核表达载体,检测该基因在真核细胞内的表达,为进一步研究其在弓形虫感染致病中的作用打下基础。方法 PCR扩增目的基因Beclin1后插入到真核表达载体pEGFP中,双酶切鉴定并进行序列测定;通过脂质体介导的方法用重组质粒转染293T细胞,再以Western blot方法检测该基因编码蛋白在真核细胞内的表达。结果 PCR扩增出目的基因Beclin1片段,大小为1 353bp,与预期值一致。构建了pEGFP-Beclin1真核表达载体,经双酶切鉴定插入片段大小正确;DNA测序后与GenBank中的Beclin1基因序列比对,同源性为100%;Western blot检测该蛋白在真核细胞内表达。结论成功构建了pEGFP-Beclin1真核表达载体,该基因编码蛋白可以在真核细胞内表达,为进一步研究该基因在弓形虫感染致病中的作用打下了基础。
【作者单位】： 安徽医科大学病原生物学教研室;安徽医科大学;
【关键词】： Beclin基因 真核表达载体 鉴定
【基金】：安徽省教育厅高校省级自然科学研究重点项目(No.KJ2013A149)
【分类号】：R382.5
【正文快照】： ***Beclin1基因也称BECN1基因,是一种自噬相关基因,它与Bcl-2基因相互拮抗调控自噬。自噬是细胞中初级溶酶体处理内源性底物的重要过程,同时参与维持细胞内蛋白代谢平衡及内环境稳定的维持,在清除废物、结构重建以及细胞生长发育中起重要作用[1-2]。近来Ⅱ型程序性细胞死亡-自

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8 唐昊U，

本文编号：993472