K652重组表达IL-6基因对NK细胞表型和功能的影响

发布时间：2017-10-08 11:42

  本文关键词：K652重组表达IL-6基因对NK细胞表型和功能的影响

  更多相关文章： 重组K IL- 自然杀伤细胞 扩增 Cr释放实验

【摘要】：目的:为了研究表达IL-6的重组K562细胞对自然杀伤细胞(NK)细胞的扩增数量、表型和功能的影响。方法:根据人类IL-6 c DNA的5'端序列,设计PCR引物以K562细胞c DNA文库的DNA为模板进行扩增,表达,转染,在K562细胞上表达IL-6基因,构建重组的K562工程细胞作为刺激细胞,以人外周血单个核细胞(PBMC)为扩增培养对象,使NK细胞在体外培养条件下得到大量的扩增。流式细胞仪分析NK细胞表型。将NK细胞作用到K562细胞,对其杀伤性进行功能分析,51Cr释放实验检测NK细胞对K562细胞杀伤水平的影响。结果:成功构建了表达IL-6的重组K562细胞,和PBMC共同孵育后,培养体系经过21 d的刺激后,IL-6重组K562细胞诱导PBMC扩增,CD56+CD16+CD3-细胞数量比诱导前扩增了(760±18)倍,CD56+CD16+CD3-细胞的纯度从培养前占PBMC的6%±0.4%,扩增后第3组结果比未扩增的多了91%±2%。细胞毒实验表明,在NK效应细胞∶K562靶细胞为5∶1时,扩增的NK细胞的杀伤率达到了92%±2%。结论:本方法以重组K562为刺激细胞,能够实现NK细胞体外的大规模制备,建立了优化的NK细胞体外扩增方法,且扩增的细胞杀伤K562细胞的活性较好。对于NK的大量扩增和应用于临床具有重要的指导意义。
【作者单位】： 河北省胸科医院 河北省肺癌防治中心;河北师范大学生命科学学院;
【关键词】： 重组K IL- 自然杀伤细胞 扩增 Cr释放实验
【基金】：2013年河北省省级重大医学研究课题(No.ZD2013063) 国家自然科学基金(No.31101638)
【分类号】：R392
【正文快照】： 现在肿瘤对人类生存健康的威胁越来越严重,对肿瘤的治疗方法也发生着越来越多的变化,各种各样的肿瘤治疗已经显现出来,成为治疗肿瘤的重要发展方向。继肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)及CD3单抗激活的杀伤细胞(CD3AK)后,自然杀伤细胞(Nature killer,NK)的杀，

本文编号：993838