GRASP55和GRASP65在介导高尔基体堆叠形成中的功能

发布时间：2017-10-08 15:14

  本文关键词：GRASP55和GRASP65在介导高尔基体堆叠形成中的功能

  更多相关文章： 高尔基体 GRASP蛋白 膜拴连

【摘要】：高尔基体在哺乳动物细胞中呈现层层堆叠的形态,参与这种堆叠形成的蛋白有GRASP55和GRASP65两种蛋白。GRASP蛋白由N末端的GRASP结构域和C末端的尾巴组成。GRASP结构域包括两个串联的PDZ结构域,其对于高尔基体膜的拴连是必须的。但是GRASP蛋白介导高尔基体膜栓连的具体分子机制并不是很清楚。我们通过已知的GRASP蛋白的结构信息,在PDZ2-PDZ2和PDZ1-CT交界面推测了几个关键的氨基酸位点,并在哺乳动物细胞中检测了这些位点的功能。我们得到了与体外实验相一致的结果,并根据这些结果提出了GRASP蛋白介导膜栓连的一种新的模型,这为探究高尔基体膜堆叠的机制提供了新的思路。
【关键词】：高尔基体 GRASP蛋白 膜拴连
【学位授予单位】：南开大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 第一章 前言9-23
• 第一节 高尔基体的结构和功能9-11
• 第二节 哺乳动物细胞高尔基体发生的分子机制11-14
• 1.2.1 裂期高尔基体解聚的重要生物学意义12-13
• 1.2.2 高尔基体解聚的分子机制13-14
• 第三节 GRASP蛋白在高尔基体形态调控中的作用14-23
• 1.3.1 GRASP的结构14-16
• 1.3.2 GRASPs与高尔基体层囊堆叠16-18
• 1.3.3 在有丝分裂期GRASP蛋白以及高尔基体形态的调节18-23
• 第二章 材料与方法23-36
• 第一节 试剂、仪器、配方23-29
• 第二节 实验方法29-36
• 2.2.1 质粒构建29-31
• 2.2.2 大肠杆菌质粒小量抽提31
• 2.2.3 大肠杆菌质粒中量提取31
• 2.2.4 大肠杆菌感受态细胞制备与转化31-32
• 2.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳32-33
• 2.2.6 蛋白质印迹33-34
• 2.2.7 BFA敏感性试验34
• 2.2.8 免疫荧光染色34-36
• 第三章 结果分析36-49
• 第一节 在细胞水平检测GRASP蛋白介导的膜拴连36-46
• 3.1.1 GRASP蛋白的PDZ2-PDZ2之间的相互作用38-40
• 3.1.2 GRASP蛋白的PDZ1-CT之间的相互作用40-46
• 第二节 诱导表达细胞系的构建46-49
• 第四章 讨论49-52
• 参考文献52-57
• 致谢57-58
• 个人简历58

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 罗川;曹丽军;赵彩平;韩明玉;;桃沙红果实α-甘露糖苷酶基因(α-man)克隆及其在软化过程中的表达分析[J];农业生物技术学报;2013年09期

2 马瑾;齐义军;刘瑞敏;王明;张天;朱晗;马远方;;肝细胞癌中差异表达N-连接糖蛋白的分析鉴定[J];解剖学报;2014年04期

3 Jana Hundt;Zhubing Li;Qiang Liu;;Post-translational modifications of hepatitis C viral proteins and their biological significance[J];World Journal of Gastroenterology;2013年47期

4 任师杰;张凤妍;祁颖;崔琨明;;法舒地尔对转化生长因子-β_2诱导的人晶状体上皮细胞迁移及细胞外基质合成的影响[J];眼科新进展;2014年05期

5 闫慧娟;勿呢尔;莫日根;范丽菲;;Rho小G蛋白相关激酶的结构与功能[J];中国细胞生物学学报;2014年07期

6 李永东;阿拉坦高勒;;Rho/Rho激酶与心血管疾病[J];医学综述;2014年18期

7 徐卫东;钱元霞;曹俊;;人pEGFP-GEF-H1载体的构建及其表达[J];胃肠病学;2014年09期

8 张宝乐;李晔;石放雄;徐银学;;猪G蛋白偶联受体12(Gpr12)基因克隆鉴定及其表达分析[J];畜牧与兽医;2014年12期

9 Chris Hawes;Petra Kiviniemi;Verena Kriechbaumer;;The endoplasmic reticulum: A dynamic and well-connected organelle[J];Journal of Integrative Plant Biology;2015年01期

10 李媛媛;安艳秋;王凤涛;冯晶;蔺瑞明;陈万权;徐世昌;;小麦中小GTP结合蛋白基因TaRop2克隆及其表达分析[J];植物遗传资源学报;2015年02期

，

本文编号：994738