D-半乳糖致衰老大鼠椎间盘退变及补肾活血汤干预的研究

发布时间：2017-10-08 21:31

  本文关键词：D-半乳糖致衰老大鼠椎间盘退变及补肾活血汤干预的研究

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【摘要】：研究目的： 本研究通过大鼠皮下注射D-半乳糖,明确D-半乳糖是否能够成功的造成大鼠衰老椎间盘退变的模型,为造椎间盘退模型增添一种新的方法有重要意义。并研究补肾活血汤对造模后椎间盘组织内TNF-α、IL-1p、TGF-p1的影响,明确补肾活血汤是否对上述细胞因子有调控作用,探索补肾活血汤防治腰椎间盘退变的部分分子生物学机制,并为延缓或阻止腰椎间盘自然退变提供客观评价指标。 研究方法： 采用SPF级3月龄健康SD大鼠92只,雌雄各半,按照随机数字表分为4组,A空白组20只,B假模型组24只,C模型组24只,D中药组24只。其中C、D两组大鼠皮下注射D-半乳糖30天造模,B组皮下注射等剂量生理盐水作为假模型组,A组自然喂养,造模成功后,D组予以补肾活血汤灌胃,其余各组予以等量蒸馏水灌胃。灌胃期间,各组大鼠予以正常饲料。灌胃结束后,取大鼠椎间盘组织,制作组织切片,在光镜下观察椎间盘组织形态,并用Elisa法测量椎间盘中TNF-α IL-1β、TGF-β1的表达水平。 研究结果： 1、光镜下观察实验大鼠椎间盘形态：A组和B组纤维环完整无开裂,其胶原纤维层稍有变薄,软骨细胞有少许增多,髓核稍有皱缩；C组椎间盘纤维环不完整,有裂缝,胶原纤维已被软骨组织取代或基本为软骨组织,并有少量似钙物质沉着,髓核成分减少或镜下不可见,并可见到骨化；D组纤维环胶原纤维层较A组和B组薄,纤维环有裂隙,软骨细胞浸润增多,髓核稍有皱缩,较A、B组为重,未见到明显骨化组织。其中,D组与C组比较,D组退变较轻。 2、分子水平：各组之间雌雄组两组比较P0.05,无统计学意义,说明性别对此次试验没有影响。①B组假手术组和A组空白组比较,统计无显著性差异(P0.05),C组模型组与A组空白组比较,有统计学意义(P=0.0180.05)。②经灌服补肾活血汤后,D组中药组与C组模型组比较,p=0.0250.05,差异有统计学意义。③所有组别在治疗4周后腰椎间盘组织内的各因子阳性表达率增高,其中模型组中细胞因子的OD值更高,进一步说明了皮下注射D-半乳糖能快速增加大鼠椎问盘内细胞因子的表达,使其退变速度加快。 研究结论： 1、随年龄增长,腰椎问盘呈现退变趋势； 2、皮下注射D-半乳糖能诱导大鼠衰老,加速大鼠椎间盘的退变,即能成功模仿衰老所致椎间盘退行性变模型； 3、补肾活血汤能有效延缓诱导衰老大鼠椎间盘的退变程度,其作用机制可能与其能够调控造模后大鼠椎间盘局部组织内的细胞因子有关。
【关键词】：D-半乳糖 椎间盘退变 补肾活血 实验研究 细胞因子
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R-332;R285.5
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 中英文对照表10-11
• 前言11-12
• 第一部分 实验材料与方法12-17
• 1.1 实验材料12-13
• 1.2 实验方法13-17
• 第二部分 实验结果与分析17-25
• 2.1 标本的采集与处理17
• 2.2 标本蜡块制作17-18
• 2.3 HE染色18-19
• 2.4 指标检测19-21
• 2.4.1 检测方法19-21
• 2.5 数据处理与统计学检验21
• 2.6 实验结果21-25
• 第三部分 讨论25-43
• 3.1 组方的讨论25-30
• 3.2 实验依据的讨论30-36
• 3.2.1 实验指标的讨论30-31
• 3.2.2 动物模型31-36
• 3.3 实验结果的讨论36-38
• 3.3.1 光镜下观察椎间盘组织学形态的讨论36-37
• 3.3.2 椎间盘组织中细胞因子Elisa的测定结果讨论37-38
• 3.4 椎间盘组织细胞因子与椎间盘退变的研究动态38-41
• 3.4.1 细胞因子在椎间盘退变中的作用39-41
• 3.4.2 针对炎症因子的治疗41
• 3.5 补肾活血汤延缓腰椎间盘退行性变的可能机理研究41-43
• 第四部分 结论与展望43-44
• 参考文献44-47
• 附图47-50
• 致谢50-51
• 附录一51-63
• 参考文献59-63
• 附录二63

【参考文献】

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本文编号：996367