壳寡糖硬脂酸嫁接物纳米材料的免疫毒性研究

发布时间：2017-10-08 21:16

  本文关键词：壳寡糖硬脂酸嫁接物纳米材料的免疫毒性研究

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【摘要】：[背景和目的] 壳寡糖硬脂酸嫁接物纳米材料(stearic acid grafted chitosan oligosaccharide nanomicelles, CSO-SA)是由浙江大学药学院药物制剂研究所研制合成。CSO-SA是利用壳聚糖(CSO)分子结构中的氨基与硬脂酸(SA)上的羧基经过偶联反应,形成两亲性的聚合物胶团。CSO-SA具有高生物相容性、可体内降解、靶向性佳、缓释可控等符合新型药物载体需要的特性,因此有望用于包载生物大分子,作为药物载体材料。 我们课题组前期研究结果表明CSO-SA存在一定程度的肺部毒性、遗传毒性等。免疫毒性作为敏感的毒性指标,是药物非临床安全性评价的一项重要内容。本实验将根据美国国家毒理学项目(National Toxicology Program, NTP)推荐的小鼠免疫毒性检测方案(USNTP,1988),从免疫病理、体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫四个方面初步评价CSO-SA对小鼠的免疫毒性。 [方法] 实验用30只C57雄性小鼠,每组6只,分为CSO-SA(0、3.6、9、18mg/kg)剂量组和环磷酰胺(CTX)阳性对照组。连续腹腔注射处理28天后,股动脉放血处死小鼠。分析小鼠体重增量和免疫器官的脏器指数；检测血常规、外周血中T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+T淋巴细胞比例；血清中免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平；用MTT法测定NK细胞活性；HE染色后经光镜观察组织病理学改变,透射电镜(TEM)观察细胞超微结构。 [结果] 1.一般情况观察 CSO-SA处理后,日常观察发现小鼠活动度下降,消瘦等表现,高剂量(18mg/kg)组表现尤其明显。 2.体重增量与脏器系数变化结果 CSO-SA反复处理可抑制小鼠生长,9、18mg/kg组的小鼠体重增长比阴性对照组显著降低(P0.05)。9、18mg/kg组小鼠脾脏脏器系数显著高于阴性对照组(P0.05)。9mg/kg组的小鼠胸腺脏器系数显著高于阴性对照组(P0.05)。 3.免疫器官组织病理学 HE染色观察发现CSO-SA反复处理后脾小体结构紊乱,白髓萎缩,红髓扩张；胸腺皮质区变薄,髓质区扩增,皮髓质接合处分界不清。电镜观察脾脏和胸腺的超微结构发现,淋巴细胞线粒体变得肿胀,还伴有空泡化现象。 4.血常规分析 血常规结果显示CSO-SA反复染毒处理后,阳性对照组各指标与阴性对照组相比均存在显著性差异(P0.05)。9、18mg/kg组中性粒细胞百分比(NE%)与阴性对照组相比显著升高(P0.05)。9、18mg/kg组淋巴细胞百分比(LY%)与阴性对照组相比显著降低(P0.05)。18mg/kg组红细胞计数(RBC)和血红蛋白含量(HGB)与阴性对照组相比显著下降(P0.05)。 5.小鼠外周血中T淋巴细胞亚型分析 CSO-SA反复染毒处理后,各剂量组CD4+T细胞相对百分比,CD8+T细胞相对百分比与生理盐水阴性对照组相比,未观察到显著性差异(P0.05)。 6.血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平 CSO-SA反复染毒处理后,3.6mg/kg组小鼠IgM水平与阴性对照组相比显著升高(P0.05)。 7.NK细胞活性检测结果 CSO-SA反复染毒处理后,18mg/kg组NK细胞活性与阴性对照组相比显著降低(P0.05)。 [结论] 本实验条件下,反复腹腔注射不同浓度(3.6、9、18mg/kg)CSO-SA会对小鼠造成一定程度的免疫毒性,18mg/kg剂量下可明显引起胸腺和脾脏的病理改变,导致NK细胞活性显著下降。
【关键词】：壳寡糖硬脂酸嫁接物纳米材料 免疫毒性
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：TB383.1;R392
【目录】：

• 致谢5-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 缩略语14-16
• 1 引言16-21
• 2 实验材料21-26
• 3.实验方法26-31
• 4.实验结果31-45
• 5 讨论45-50
• 6 结论50-51
• 参考文献51-54
• 综述54-66
• 参考文献63-66
• 作者简历及在学习期间所取得的科研成果66

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张正生;薛绍玲;;甲壳素/壳聚糖的应用研究进展[J];科技信息(科学教研);2007年21期

2 赵宇亮,柴之芳;纳米生物效应研究进展[J];中国科学院院刊;2005年03期

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本文编号：996289