Ghrelin对小鼠海马齿状回神经再生及海马功能性记忆环路形成的影响

发布时间：2017-10-08 20:20

  本文关键词：Ghrelin对小鼠海马齿状回神经再生及海马功能性记忆环路形成的影响

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【摘要】：目的：探讨ghrelin对小鼠海马神经再生、空间记忆的获取及海马功能性记忆环路形成的作用。 方法：本研究结合整体行为学分析及免疫组织化学技术。将小鼠(C57/B16)随机分为4组,每组10只,均腹腔注射等量BrdU(100mg/kg,每天两次连续注射5天)以标记海马齿状回颗粒细胞下区(Subgranular Zone, SGZ)的增生细胞。同时,处理组小鼠接受ghrelin腹腔注射(80ug/kg,一天一次,连续注射8天),对照组小鼠接受等体积的生理盐水处理。注射后1周及5周,同时对4组(ghrelin+lw, ghrelin+5w, ns+1w及ns+5w)小鼠行水迷宫训练及空间记忆测试。测试后90分钟取脑,进行免疫组化分析。 结果： 1.荧光免疫组化结果表明,ghrelin处理组(ghrelin+lw, ghrelin+5w) BrdU免疫阳性(BrdU+)细胞数显著多于同时期生理盐水对照组(ns+lw, ns+5w)。但ghrelin+5w及ns+5w组BrdU+细胞数目均显著少于1w组。 2. BrdU+/DCX+双标结果显示,ghrelin+1w处理组BrdU+/DCX+双标的新生神经元数目明显多于同时期生理盐水对照组(ns+1w)。 3.由于焦虑可影响神经再生,我们考察了ghrelin对动物焦虑的影响。高架十字迷宫和旷场实验结果表明,ghrelin(80ug/kg)腹腔注射不影响小鼠的焦虑状态。 4.水迷宫实验表明,4组小鼠的空间学习及记忆获取能力无差别。空间记忆测试激活的齿状回颗粒神经元(Fos+)数目亦相同,提示ghrelin(80ug/kg)预处理不影响小鼠空间记忆的获取。 5. BrdU+/Fos+双标结果显示,c-fos+神经元在新生神经元(BrdU+)中有表达,说明新生神经元参与功能性海马记忆环路的形成。但ghrelin+5w组BrdU+/Fos+双标的新生神经元数与对照组(ns+5w组)相比无差别,表明ghrelin介导的神经再生不足以影响新生神经元在记忆环路的整合或记忆环路的形成。 结论：腹腔注射ghrelin (80ug/kg)促进海马齿状回神经再生,但对海马依赖的空间记忆的获取无影响。Ghrelin介导的神经再生亦不参与功能性海马记忆环路的形成,提示ghrelin对记忆的调节作用可能与其促进神经再生无关。
【关键词】：ghrelin 神经发生 海马 5-溴脱氧尿核苷 Fos蛋白
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要2-4
• Abstract4-6
• 目录6-7
• 引言7-9
• 第一章 实验材料9-11
• 1.1 实验动物9
• 1.2 药品及配制9
• 1.3 主要实验仪器9-11
• 第二章 实验方法11-14
• 2.1 动物分组及ghrelin处理11
• 2.2 行为学实验方法11-12
• 2.3 经心脏灌流固定,脑片制备12
• 2.4 免疫荧光染色12-13
• 2.5 统计学方法13-14
• 第三章 实验结果14-16
• 3.1 BrdU~+新生神经元在海马SGZ区的表达14
• 3.2 BrdU~+/DCX~+双标的新生神经元在海马SGZ区的表达14
• 3.3 腹腔注射ghrelin对小鼠焦虑状态的影响14-15
• 3.4 各组小鼠在水迷宫实验中的空间学习记忆15
• 3.5 c-fos~+神经元在海马齿状回的表达15
• 3.6 腹腔注射ghrelin对新生神经元参与学习记忆环路的影响15-16
• 第四章 讨论16-19
• 第五章 结论19-20
• 参考文献20-22
• 附图22-29
• 综述29-45
• 参考文献38-45
• 攻读学位期间的研究成果45-46
• 英文~.略词表46-47
• 致谢47-48

【共引文献】

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本文编号：996060