H9N2亚型AIV感染鸡脑组织损伤及细胞凋亡的研究

发布时间：2017-03-23 17:03

  本文关键词：H9N2亚型AIV感染鸡脑组织损伤及细胞凋亡的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：H9N2亚型禽流感病毒(Avain influenza virus,AIV)属低致病性的禽流感病毒,广泛分布于世界各地。家禽感染H9N2亚型AIV后除了引起咳嗽,呼吸困难、产蛋下降等临床症状外,还能引起感染鸡歪头,伸颈等神经症状。然而,目前关于H9N2亚型AIV感染鸡后脑组织损伤方面的研究很少。为了阐明H9N2亚型AIV感染鸡后对脑组织损伤的致病机理,本次试验用H9N2亚型AIV(A/chicken/Shaanxi/11/2012)毒株采用滴鼻点眼的方法人工感染10周龄非免疫健康鸡,在感染后不同时间采取发病鸡脑组织,HE染色观察脑组织的病理组织学变化,TUNEL和Caspase-3酶活性法检测H9N2 AIV诱导的脑组织细胞凋亡情况。结果如下:1.H9N2亚型AIV人工感染10周龄非免健康鸡,采用滴鼻点眼的方法感染H9N2AIV。每天观察记录鸡的临床症状,并分别在感染后第0 d、2 d、4 d、6 d、8 d、15 d放血处死5只小鸡,无菌采集脑组织。用HE染色,观察攻毒后鸡脑组织发生的组织学病变;结果显示大脑组织软脑膜下血管扩张、充血,神经元变性、坏死,退行性变化的神经元胞浆内可见多个小胶质细胞侵入;小脑组织疏松、水肿,神经元内尼氏小体消失;细胞出现空泡,细胞核浓缩,溶解消失,炎性细胞浸润,常环绕血管,集聚于血管周围形成血管套。2.TUNEL染色结果显示H9N2亚型AIV感染小鸡脑组织发生细胞凋亡,且随着感染天数的增加,细胞凋亡越明显,并在4 d和6 d时,细胞凋亡最严重。在感染后第4 d检测大脑和小脑组织中Caspase-3酶活性均比健康鸡高。凋亡检测证实了H9N2亚型AIV感染小鸡可诱导脑组织细胞发生凋亡。综上所述,H9N2亚型AIV感染小鸡后,脑组织发生了不同程度的非化脓性脑炎病理学损伤和组织细胞凋亡,随着时间的推移,组织损伤和细胞凋亡更严重,感染后4 d-6d是病理损伤最严重的时期。随后鸡群逐步康复,在感染后15 d临床症状基本恢复正常。试验表明,H9N2亚型AIV感染能引起小鸡脑组织非化脓性炎症,从而导致鸡出现神经症状。
【关键词】：H9N2亚型禽流感病毒 脑组织 病理变化 凋亡 鸡
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S858.31
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 文献综述10-18
• 第一章 禽流感病毒的研究进展10-18
• 1.1 禽流感病毒概述10-13
• 1.1.1 禽流感概述10
• 1.1.2 病原学10-11
• 1.1.3 致病性11-12
• 1.1.4 宿主范围12-13
• 1.1.5 H9N2亚型禽流感病毒13
• 1.2 AIV对神经系统致病性的研究13-15
• 1.2.1 神经系统13-14
• 1.2.2 中枢神经系统的防御机制14
• 1.2.3 禽流感对神经系统致病性研究14-15
• 1.3 禽流感诱导细胞凋亡机制研究概况15-17
• 1.3.1 细胞凋亡15
• 1.3.2 细胞凋亡的机制15-17
• 1.4 本研究的目的及意义17-18
• 试验研究18-33
• 第二章 小鸡感染H9N2亚型AIV后脑组织病理学观察18-24
• 2.1 材料18
• 2.1.1 毒株18
• 2.1.2 试验动物18
• 2.1.3 主要试剂仪器18
• 2.2 方法18-20
• 2.2.1 病毒复苏与增殖18-19
• 2.2.2 测定病毒的EID5019
• 2.2.3 人工感染试验19
• 2.2.4 石蜡切片的制作19-20
• 2.2.5 HE染色20
• 2.2.6 显微照相20
• 2.3 结果20-23
• 2.3.1 感染鸡的临床症状20-21
• 2.3.2 感染小鸡的病理变化21-23
• 2.4 讨论23
• 2.5 小结23-24
• 第三章 H9N2亚型AIV感染小鸡后脑组织细胞凋亡检测24-33
• 3.1 材料24
• 3.1.1 毒株24
• 3.1.2 试验动物24
• 3.1.3 主要试剂仪器24
• 3.2 方法24-27
• 3.2.1 动物感染试验24-25
• 3.2.2 石蜡切片的制作25
• 3.2.3 TUNEL法染色25-26
• 3.2.4 组织中Caspase-3 酶活性检测26-27
• 3.2.5 显微照相27
• 3.3 结果27-32
• 3.3.1 感染鸡大脑和小脑组织TUNEL染色27-29
• 3.3.2 Caspase-3 酶活性检测情况29-32
• 3.4 讨论32
• 3.5 小结32-33
• 结论33-34
• 参考文献34-38
• 致谢38-39
• 作者简介39

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1 金梅林,陈焕春;细胞凋亡及基因调控在兽医病毒学领域研究动态[J];动物医学进展;2000年04期

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6 孙培明,王志亮,李玉保,鲍恩东;热应激蛋白70与细胞凋亡[J];中国动物检疫;2003年06期

7 薛占永,呼秀智;细胞凋亡研究进展[J];邯郸农业高等专科学校学报;2003年04期

8 曾林;钟仰进;梁红;曹阳;;细胞凋亡的研究及进展[J];广东蚕业;2003年03期

9 刘会娟;姜龙;;细胞凋亡的分子机理及其检测方法研究进展[J];畜禽业;2006年02期

10 陈庆华;;细胞凋亡机制的研究应用[J];广东畜牧兽医科技;2006年02期

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1 陈颖丽;李前忠;;不同亚细胞位置的细胞凋亡蛋白质的结构特性分析[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年

2 孙英丽;赵允;朱山;翟中和;;植物细胞凋亡及其机理的研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年

3 刘二龙;袁慧;;锌与细胞凋亡[A];2003全国家畜内科学学术研讨会论文专辑[C];2003年

4 邱洁;高海青;;锌在细胞凋亡中的作用研究进展[A];山东省微量元素科学研究会第三届学术研讨会论文汇编[C];2006年

5 俞雅萍;;细胞凋亡的机制及途径和影响因素[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年

6 于青;袁伟杰;姚建;;晚期糖基化终末产物引起足细胞凋亡的机制[A];2007年浙沪两地肾脏病学术年会资料汇编[C];2007年

7 季宇彬;尹立;汲晨锋;;调控细胞凋亡的线粒体因素[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年

8 吴经纬;汤长发;;运动中细胞凋亡的线粒体变化特征[A];湖南省生理科学会2006年度学术年会论文摘要汇编[C];2007年

9 蒲小平;李长龄;屠鹏飞;宋志宏;;中药肉丛蓉成分抗神经细胞凋亡的实验研究[A];第七届全国生化药理学术讨论会论文摘要集[C];2000年

10 江键;宋诚荣;崔黎丽;方影;王小平;;静电场对细胞凋亡作用的初步探讨[A];中国物理学会第九届静电学术年会论文集[C];2000年

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1 商东;“细胞凋亡”与临床医学[N];中国医药报;2001年

2 张志军;细胞凋亡与中医药[N];中国医药报;2002年

3 ;“细胞凋亡疗法”正逐步成为治疗癌症的新途径[N];中国高新技术产业导报;2002年

4 记者张建松;治疗癌症新途径：细胞凋亡疗法[N];科技日报;2002年

5 李明辉;“细胞凋亡”治癌症[N];医药导报;2002年

6 洪敏;细胞凋亡研究引人关注[N];中国医药报;2008年

7 陶春祥;细胞凋亡对心脏疾病的影响[N];中国医药报;2003年

8 本报实习记者 梁媛媛;薛定：发现癌症“开关”[N];北京科技报;2010年

9 高书明;诱导癌细胞凋亡[N];中国医药报;2004年

10 勇汇;中药诱导癌细胞凋亡研究进展[N];中国医药报;2002年

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1 杨利;系列多氮类化合物的抗肿瘤活性研究[D];武汉大学;2012年

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9 杨鑫铖;Hedgehog信号通路在大鼠急性胰腺炎腺泡细胞凋亡中的作用[D];河北医科大学;2015年

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