低血压脑死亡大动物模型的建立及其供肝损伤机制研究

发布时间：2017-10-13 23:10

  本文关键词：低血压脑死亡大动物模型的建立及其供肝损伤机制研究

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【摘要】：目的：脑死亡供体已为当前器官移植领域重要供体来源,国外大部分供体均来自脑死亡,国内由于受传统观念及整体医疗水平限制,脑死亡供体较少而且多属于血流动力学不稳定,存在一定时间低血压的不可控型。就脑死亡供体本身而言,会导致机体产生系列病理生理学的变化,从而损害供体器官质量,尤其是循环不稳定、存在较长时间低血压的供体,其机制较复杂,尚未完全阐明。为明确低血压对脑死亡供体肝脏的损害程度及其机制,本研究拟建立低血压脑死亡供肝大动物模型,从全身及供肝局部血流动力学变化、肝功能变化、肝组织病理改变及炎症因子变化进行深入研究。 方法：选用16只巴马小型猪,采用改良的缓慢匀速颅内水囊加压法建立猪脑死亡模型,取颅骨中线处钻孔,于硬膜外置入Foley水囊注水加压,通过升高颅内压使脑组织缺血缺氧从而进行诱导脑死亡,并间隔12h进行脑死亡确认。本研究通过密切监测脑死亡维护期间的整体血流动力学变化,肝动脉及门静脉血流量变化,并通过血液生化学指标,肝脏病理及电镜,供肝标本分子生物学检测等方法明确脑死亡状态下低血压对供肝质量的影响,并探讨其内在损伤机制。 结果：①16只猪中14头成功建立脑死亡模型,给予呼吸及循环支持后,8只成功维持12h；③随着脑死亡时间延长,实验动物心率逐渐升高,并出现较大幅度的波动；平均动脉压(MAP)逐渐降低,门静脉及肝动脉血流逐渐下降,胆汁量及尿量逐渐减少,各时间点间有统计学差异(P0.05)；③血清谷丙转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)出现逐渐升高,各时间点间有统计学差异(P0.05)；④肝组织HE染色提示：脑死亡3小时(h)以内肝结构基本正常,可逆性改变,3h以后肝细胞水肿逐渐加重,挤压肝窦导致微循环障碍,肝细胞进一步缺氧,微泡性变性加重；随时间延长5h以后大泡性脂肪变性提示慢性缺血性损伤,7h以后肝细胞出现凋亡,并出现气球样变性,提示肝细胞不可逆性损伤。⑤脑死亡后随着时间延长,肠源性内毒素释放明显增加；⑥与开腹后相比,脑死亡后3h、脑死亡后6h及脑死亡后12h,肝组织肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-1β(IL-1β)、P-选择素(P-Selectin)及内皮素-1(ET-1)水平逐渐升高,各时间点具有统计学差异(P0.05)；缺氧诱导因子-lα (HIF-lα)及一氧化氮(NO)水平逐渐下降,各时间点具有统计学差异(P0.05)：干扰素-γ(IFN-γ)表达于3h升高,其后逐渐下降,肝组织三磷酸腺苷(ATP)含量变化呈现波动趋势。 结论：①改良的缓慢匀速颅内水囊加压法可以成功地建立低血压猪脑死亡模型；②血流动力学变化、肝功能、供肝病理、透射电镜及炎症因子检测均提示脑死亡后,供肝逐渐出现不可逆损害；③脑死亡后低血压状态对供肝损害机制,涉及肝脏低灌注；肠源性内毒素释放、TNF-a、IL-1β及P-Selectin升高介导的炎症反应；ET-1升高及NO降低导致的微循环紊乱；抑制HIF-1α表达造成的低氧损害加重。
【关键词】：肝移植 脑死亡 大动物模型 供肝损害 缺血-再灌注损伤
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R-332;R617
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-11
• 前言11-14
• 1. 材料与方法14-23
• 1.1 试剂仪器14-15
• 1.2 实验动物与分组15
• 1.3 实验方法15-23
• 2. 实验结果23-36
• 2.1 一般情况23
• 2.2 加压过程中颅内压ICP及MAP变化趋势23-24
• 2.3 脑死亡后心率变化24
• 2.4 脑死亡后MAP变化24-25
• 2.5 脑死亡后门静脉血流变化25-26
• 2.6 脑死亡后肝动脉血流变化26
• 2.7 脑死亡后尿量变化26-27
• 2.8 脑死亡后胆汁量变化27
• 2.9 脑死亡后肝功能变化27-28
• 2.10 脑死亡后门静脉血内毒素变化28-29
• 2.11 脑死亡后肝脏病理变化29-31
• 2.12 脑死亡后肝脏电镜变化31
• 2.13 脑死亡后肝脏炎症介质变化31-36
• 3. 讨论36-44
• 3.1 颅内加压方式的选择36-37
• 3.2 脑死亡麻醉37-39
• 3.3 供肝损伤机制39-44
• 全文结论44-45
• 论文创新点45-46
• 参考文献46-56
• 硕士期间发表论文和参加科研情况说明56-57
• 综述57-68
• 综述参考文献63-68
• 致谢68

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：1027591