抗苗勒管激素（AMH）在三种多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠模型中的变化及相关性分析

发布时间：2017-10-19 23:34

  本文关键词：抗苗勒管激素（AMH）在三种多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠模型中的变化及相关性分析

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【摘要】：多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)为育龄期女性常见内分泌疾病,发病率6-10%,以持续性排卵障碍、高雄激素血症、卵巢多囊化为特征。抗苗勒管激素(Anti-mullerian Hormone, AMH),又称苗勒管抑制素(Mullerian inhibiting substance, MIS),是转化生长因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)超家族成员之一。AMH在卵巢中由卵巢颗粒细胞分泌,在卵泡生长发育过程中具有抑制卵泡募集和FSH诱导的卵泡生长的作用。PCOS患者血清AMH较正常女性升高2-3倍,因临床取材困难,因此寻找合适的动物模型对于研究AMH在PCOS中的作用具有重要意义。目前国内外存在的PCOS动物模型多种多样,造模所用动物及造模方法各不相同,各种模型或在内分泌方面,或在形态学方面与PCOS有相似之处,本实验目的在于探讨AMH在三种常用大鼠PCOS模型中的变化情况并分析AMH与其它指标之间的相关性,为后续研究AMH在PCOS发生发展中的作用提供动物模型基础。第一部分：AMH在来曲唑大鼠PCOS模型中的变化及相关性分析目的：采用来曲唑灌胃方法进行造模,根据PCOS Rotterdam2003诊断标准对模型进行评价,对模型进行特点分析,并研究AMH在模型中的变化情况及与其它指标的相关性。方法：选取6周龄雌性SD大鼠,来曲唑灌胃造模,观察大鼠阴道涂片观察性周期变化,记录大鼠体重变化,测量大鼠双侧离体卵巢湿重及体积,利用ELISA法检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、胰岛素(INS), AMH。对卵巢行石蜡切片行HE染色光镜观察其病理学改变,免疫组化及western blot检测AMH及AMH-RⅡ蛋白表达情况,并用统计学软件统计分析模型特点。结果：来曲唑模型组表现出明显的雄激素、LH升高,孕酮降低以及卵巢多囊性改变,囊性扩张卵泡数和总卵泡数明显大于对照组。此外,模型组大鼠体重、卵巢湿重及卵巢体积也明显大于对照组。血清AMH及卵巢组织局部AMH、AMH-RⅡ的表达均升高。血清抗苗勒管激素与雄激素、生长卵泡数呈正相关,与体重呈负相关。结论：来曲唑模型组采用成年大鼠造模,模型表现出明显的体重增加,卵巢体积及湿重增加,并有胰岛素抵抗表现,根据Rotterdam诊断标准为成功的PCOS模型。相关性分析显示血清抗苗勒管激素的升高可能由于雄激素相关的生长卵泡增多引起。第二部分：AMH在炔诺酮hCG大鼠PCOS模型组中的变化及相关性分析目的：采用18-甲基炔诺酮联合hCG法对大鼠进行造模,根据Rotterdam诊断标准对模型进行评价,对模型进行特点分析,并研究AMH在模型中的变化情况及与其它指标的相关性。方法：选取23日龄雌性SD大鼠,皮下埋植18-甲基炔诺酮避孕硅胶棒,皮下注射hCG。观察大鼠阴道口开放日龄,大鼠阴道涂片观察性周期变化,记录大鼠体重变化、大鼠双侧离体卵巢湿重及体积,利用ELISA法检测大鼠血清中相关激素水平,对卵巢行石蜡切片行HE染色光镜观察其病理学改变,免疫组化及western blot检测AMH及AMH-RII蛋白表达情况,并用统计学软件统计分析模型的特点。结果：模型组较对照组相比雄激素明显升高,卵巢多囊性改变明显,卵巢湿重及卵巢体积明显增大,但模型组大鼠体重较对照组无明显增加。AMH及其受体在卵巢组织局部表达增高,未发现AMH与其它指标之间明显相关性。结论：炔诺酮hCG模型组采用幼龄大鼠造模,雄激素升高,卵巢多囊性改变明显,符合Rotterdam2003诊断标准,为成功的PCOS大鼠模型。AMH在卵巢局部组织高表达机制有待进一步研究第三部分：AMH在硫酸普拉睾酮钠hCG大鼠PCOS模型组中的变化及相关性分析目的：采用硫酸普拉睾酮钠联合hCG法对大鼠进行造模,根据Rotterdam诊断标准评价模型,对模型进行特点分析,并研究AMH在模型中的变化情况及与其它指标的相关性。方法：选取23日龄雌性SD大鼠,每天皮下注射硫酸普拉睾酮钠和hCG,观察大鼠阴道口开放日龄,大鼠阴道涂片观察性周期变化,记录大鼠体重变化,测量大鼠双侧离体卵巢湿重及体积,利用ELISA法检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、胰岛素(INS),观察卵巢病理学改变,免疫组化及western blot检测AMH及AMH-RII蛋白表达情况,并用统计学软件统计分析模型特点。结果：硫酸普拉睾酮钠hCG模型组卵巢体积明显增加,病理切片显示有卵巢多囊性改变,但在激素方面仅表现出孕酮降低,其他激素方面的表现不明显。卵巢组织局部AMH及AMH-RⅡ表达增高,但血清AMH较对照组相比无明显改变。血清AMH与大鼠体重及生长卵泡数均呈正相关。结论：硫酸普拉睾酮钠hCG模型与人类PCOS表现差异较大,作为PCOS模型来说稳定性及重复率低。AMH的增高可能由于生长卵泡增多所致。第四部分：总结讨论
【关键词】：多囊卵巢综合征 抗苗勒管激素 来曲唑 大鼠 模型 多囊卵巢综合征 18-甲基炔诺酮 抗苗勒管激素 大鼠 模型 多囊卵巢综合征 抗苗勒管激素 硫酸普拉睾酮钠 大鼠 模型
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R711.75;R-332
【目录】：

• 缩略词表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-15
• 第一部分：AMH在来曲唑大鼠PCOS模型中的变化及相关性分析15-29
• 引言15-16
• 材料与方法16-24
• 结果24-27
• 讨论27-29
• 第二部分：AMH在炔诺酮&hCG大鼠PCOS模型中的变化及相关性分析29-36
• 引言29
• 材料与方法29-31
• 结果31-34
• 讨论34-36
• 第三部分：AMH在硫酸普拉睾酮钠&hCG大鼠PCOS模型中的变化及相关性分析36-42
• 引言36
• 材料与方法36-38
• 结果38-40
• 讨论40-42
• 第四部分：总结讨论42-45
• 参考文献45-50
• 全文小结50-51
• 在读期间发表的学术论文及研究成果51-52
• 综述52-59
• 参考文献56-59
• 致谢59-60

【共引文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

1 徐玉芬;生精汤去多糖处理对PCOS大鼠促排卵作用的实验研究[D];浙江中医药大学;2010年

2 刘艳丽;来曲唑法和脱氢表雄酮法诱导PCOS大鼠模型的比较研究[D];郑州大学;2011年

3 汪宇;钙网质蛋白和半乳凝素-3在多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜的表达及意义[D];内蒙古医学院;2011年

4 焦楠;化痰祛瘀补肾法治疗肥胖型多囊卵巢综合征的临床观察[D];北京中医药大学;2012年

5 王萍;肥胖型多囊卵巢综合征患者躯体、心理、社会功能特征分析[D];南京医科大学;2012年

6 马兰;基于形态学途径探讨中药治疗多囊卵巢综合征不孕的作用机制[D];北京中医药大学;2013年

7 朱文丽;网膜素-1在多囊卵巢综合征大鼠中的表达及二甲双胍的干预作用[D];河北医科大学;2013年

8 林洁;Irisin蛋白在多囊卵巢综合征大鼠代谢中的作用研究[D];福建医科大学;2014年

9 彭颖洁;加味二陈汤配合埋线对肥胖型多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗的影响[D];山东中医药大学;2014年

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本文编号：1064003