ASIC3在耐药性癫痫患者及大鼠模型脑组织中的表达及功能研究

发布时间：2017-10-25 00:28

  本文关键词：ASIC3在耐药性癫痫患者及大鼠模型脑组织中的表达及功能研究

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【摘要】：有研究发现酸敏感离子通道（ASICs）对癫痫的发生及中止可能有着重要作用。酸敏感离子通道3（ASIC3）作为ASICs家族中对细胞外pH值变化反应最敏感的一个亚型，同时表达在大鼠的周围神经系统（PNS）和中枢神经系统（CNS）。本研究的目的只要有了解ASIC3在耐药性癫痫患者及大鼠模型脑组织中的表达是否发生了变化，并通过癫痫大鼠模型及细胞模型探讨ASIC3在耐药性癫痫中的功能及可能的机制。我们从课题组先前收集的脑组织标本库中随机选取25例耐药性颞叶癫痫（TLE）患者手术切除的颞叶皮质作为病例组，，收集10例无癫痫及其他疾病的脑外伤患者行减压术后的颞叶皮质作为对照组，用荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ASIC3基因mRNA水平的变化，用western blot、免疫组化及免疫荧光双标检测ASIC3蛋白的表达变化及表达部位；同步建立癫痫大鼠模型，用相同的实验技术进一步验证ASIC3的表达变化，并通过注射ASIC3特异性的抑制剂APETx2，观察大鼠行为学的变化，以期发现ASIC3在癫痫中的功能；采用膜片钳技术在癫痫细胞模型中分别观察APETx2对椎体细胞及中间神经元的影响来检测ASIC3的可能作用机制。研究发现ASIC3在颞叶癫痫患者脑皮质中mRNA水平显著降低，但在蛋白水平较对照组升高；ASIC3蛋白主要表达于神经元的胞膜与胞浆，较少的表达于星形胶质细胞的胞体处，树突处未见表达； ASIC3与抑制性的GABAergic的中间神经元共表达；以上这些实验结果在动物模型中都得到了验证。研究表明注射APETx2阻断ASIC3大鼠癫痫发作潜伏期明显缩短，发作程度明显加重；分别抑制椎体神经元和中间神经元上的ASIC3，两种神经元的放电频率均明显降低。ASIC3在颞叶癫痫患者及点燃大鼠脑组织中表达升高，提示其可能参与了癫痫的发生发展；行为学实验证实了ASIC3有抗癫痫发作的作用，而进一步的实验提示其可能是通过激活中间神经元上的ASIC3而发挥抑制癫痫发作的作用。
【关键词】：酸敏感离子通道3 颞叶癫痫 APETx2 中间神经元
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R742.1;R-332
【目录】：

• 符号说明5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-10
• 前言10-11
• 1 材料方法11-29
• 2 结果29-32
• 3 讨论32-34
• 全文总结34-35
• 参考文献35-39
• 附图39-48
• 文献综述48-63
• 参考文献56-63
• 致谢63-64
• 攻读学位期间发表及待发表的文章64-65

【共引文献】

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9 陈s

本文编号：1091271