共表达丙性肝炎病毒结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒制备与鉴定

发布时间：2017-10-28 19:22

  本文关键词：共表达丙性肝炎病毒结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒制备与鉴定

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【摘要】：旨在制备共表达丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc慢病毒VSVppHCV。通过构建共表达HCV结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒表达载体pCSGluc2aCE1E2,与包膜质粒pVSVG,包装质粒pHR′CMVΔ8.2共转染HEK 293T的方式获取慢病毒,将慢病毒感染细胞后,对细胞上清中Gluc荧光素酶活性、细胞中HCV特异蛋白的表达等进行表达鉴定。结果表明:浓缩后获得的慢病毒浓度为1×108 TU/mL,电镜负染观察到直径约为100nm带包膜的浓缩慢病毒颗粒;慢病毒VSVpp-HCV感染细胞后,细胞内HCV特异蛋白及上清中Gluc荧光素酶的表达呈平行关系。因此通过检测Gluc荧光素酶的表达水平可反映HCV结构蛋白表达水平,这为建立基于慢病毒感染的带有报告基因的HCV转基因小鼠模型提供了基础。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;内蒙古医科大学 微生物教研室;
【关键词】： 慢病毒 HCV 结构蛋白 分泌型荧光素酶
【基金】：国家自然科学基金(81373229) 传染病科技重大专项(2009ZX10004-705,-715)
【分类号】：R373.2
【正文快照】： 2.内蒙古医科大学,微生物教研室,呼和浩特010059)丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是威胁人类健康的重要病原体之一,可以在人体肝脏形成持续性感染,导致慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化和肝癌[1]。据世界卫生组织统计,全世界HCV感染者超过1.7亿,每年全球新发感染者约为350万人

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本文编号：1109620