肾衰方干预腺嘌呤导致慢性肾衰模型大鼠的实验研究

发布时间：2017-11-08 20:27

本文关键词：肾衰方干预腺嘌呤导致慢性肾衰模型大鼠的实验研究

【摘要】：目的：本实验研究从病理形态学、免疫组织化学染色和分子生物学等多角度、多靶点探讨中药复方探讨肾衰方干预腺嘌呤灌胃所致慢性肾衰竭模型大鼠的作用机制。材料与方法： 1.造模方法：用腺嘌呤灌胃的方法制作慢性肾衰竭失代偿期模型。 2.动物分组：模型制备成功的慢性肾衰竭大鼠，按体质量随机分为4组：肾衰模型组，按10ml/kg每日灌胃给予等量的生理盐水；肾衰方高剂量组，按24g/kg日二次灌胃给予肾衰方；肾衰方低剂量组，按24g/kg日一次灌胃给予肾衰方；药物对照组，按0.9g/kg日一次灌胃给予析清胶囊治疗；正常组，日一次灌胃给予等量生理盐水。以上各组治疗时间均为13周。 3.模型评价：通过模型大鼠肾组织HE染色，观察肾组织病理形态学的变化，评价模型是否制备成功。 4.肾衰方干预腺嘌呤灌胃所致慢性肾衰竭的模型大鼠整体状态的影响。观察各组大鼠活动状态、体毛、活动、行为、体重等变化。 5.肾衰方干预腺嘌呤灌胃所致慢性肾衰竭的模型大鼠血液生化的影响。检测各组大鼠血红素、测定大鼠血钙，磷，肌酐，尿素氮。 6.肾衰方干预腺嘌呤灌胃所致慢性肾衰竭的模型大鼠TGF-β1、MCP-1及mRNA表达的影响。通过免疫组织化学染色方法，结合图像半定量分析技术，研究TGF-β1蛋白表达在慢性肾功能衰竭大鼠的变化，以及肾衰方干预腺嘌呤灌胃所致慢性肾衰竭的模型大鼠TGF-β1、MCP-1表达的机制。通过RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)的方法，结合图像半定量分析技术，研究TGF-β1蛋白表达在慢性肾功能衰竭大鼠的变化，以及肾衰方干预腺嘌呤灌胃所致慢性肾衰竭的模型大鼠TGF-β1mRNA、MCP-1mRNA表达的机制。结果：肾衰方可以增加慢性肾衰大鼠体重，改善各组大鼠Bun，Scr，P，Ga和Ab的数值，与模型组相比较，有显著性差异（P＜0.05）；与模型组相比较，肾衰方可以降低慢性肾衰竭模型大鼠血肌酐、血尿素氮含量，降低慢性肾衰模型大鼠磷含量，升高血钙含量；与模型组相比，肾衰方可以提高慢性肾衰竭模型大鼠血红蛋白（P＜0.05）；肾衰方组大鼠肾脏组织TGF-β1、MCP-1/TGF-β1mRNA、MCP-1mRNA表达显著低于模型组大鼠的TGF-β1、MCP-1/TGF-β1mRNA、MCP-1mRNA表达（P＜0.05）。结论：肾衰方能调节慢性肾衰竭模型大鼠的饮食量和饮水量，增长体重，改善生存状态；肾衰方能通过改善慢性肾衰模型大鼠的肾功能、调节钙磷代谢方面发挥其治疗作用；病理形态学显示，，肾衰方能明显抑制慢性肾衰竭模型大鼠肾组织纤维化的进展，从而延缓肾衰的发展；免疫组化和分子生物学显示，肾衰方通过下调慢性肾衰大鼠肾脏组织TGF-β1、MCP-1蛋白及mRNA的表达，进而抑制肾间质纤维化的进展，发挥延缓慢性肾衰的发病进程。
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R-332;R277.5

【参考文献】

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