慢性应激对海马功能和结构的不对称影响

发布时间：2017-11-09 12:23

  本文关键词：慢性应激对海马功能和结构的不对称影响

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【摘要】：目的：构建慢性不可预见应激大鼠模型，从功能（主要为行为表现）、结构以及功能蛋白分子表达三方面，系统地探讨慢性应激对海马（功能和结构）的不对称影响，并进一步探讨其可能的机制。 方法：雄性Sprague-Dawley大鼠，筛选后无差异地分为对照组（n=12）和慢性应激组（n=12），采用给予大鼠5周慢性不可预见温和应激（CUMS）的方法建立慢性应激模型。观测模型建立期间大鼠体重变化并采取旷场实验观测大鼠焦虑水平、活动能力和探索能力等行为指标，考察慢性应激模型是否建立成功。海马空间认知功能通过Morris水迷宫实验和Y迷宫实验进行检测，探讨慢性应激对动物空间线索信息的获得、保持和提取能力（学习和记忆能力）的影响。行为实验后，进一步研究慢性应激对两脑半球左右海马的影响，主要为神经元的形态和数量变化，并采用免疫组织化学实验检测神经元自噬水平。同时采用蛋白免疫印迹方法，检测左右两侧海马功能蛋白Gap-43蛋白表达的变化。 结果：1、慢性应激对大鼠空间认知功能的影响：模型组大鼠的体重增长受到抑制，旷场实验中模型组大鼠行进距离、站立次数、穿越中央格次数均显著减少，表明本研究慢性应激大鼠模型建立成功。Morris水迷宫实验中，模型组大鼠逆转学习的潜伏期延长，逆转测试阶段目标象限的停留时间较对照组显著减少，距平台所在位置平均距离增加；Y迷宫实验中，模型组大鼠在新异臂的停留时间和穿越次数均较对照组少，，且差异显著。 2、慢性应激对大鼠海马结构的影响：对照组大鼠的海马CA1区锥体细胞清晰饱满，分布紧密规则；而模型组大鼠海马CA1区锥体细胞层较薄，树突萎缩，细胞间隙增大，细胞胞体缩小，排列稀疏紊乱，细胞数减少。对照组大鼠的海马CA3区锥体细胞排列整齐，细胞质染色深；而模型组大鼠海马CA3区锥体细胞排列稀疏散乱，细胞间隙增大，细胞质染色淡，细胞数量减少。对照组大鼠的海马DG区颗粒细胞清晰完整，分布面积大且排列密集；而模型组大鼠海马DG区颗粒细胞除部分有些许变性外，大部分与对照组无异。与对照组相比，模型组大鼠海马CA3区神经细胞数减少，并且慢性应激后，模型组大鼠海马右侧CA3区神经元数量显著小于左侧；同时，模型组大鼠海马CA1区神经元数量减少，左右两侧CA1区的细胞数均显著小于对照组；然而相较于对照组，模型组大鼠在海马DG区上神经元数量却并未发生显著变化。 3、慢性应激对大鼠海马功能蛋白GAP-43蛋白表达的影响：与对照组相比，模型组大鼠右侧海马Gap-43蛋白表达上调，左侧海马无显著变化；同时模型组右侧海马蛋白表达水平显著高于左侧。 结论： 1、慢性应激导致的大鼠空间学习记忆认知功能损伤与海马神经元形态及数量改变有关； 2、慢性应激导致模型组大鼠海马CA3区神经元形态及数量发生不对称性改变，表明慢性应激可能存在对大鼠右侧海马特异性损伤的现象； 3、慢性应激导致模型组大鼠海马CA1、CA3区神经细胞自噬水平提升，表明慢性应激导致的大鼠海马CA1、CA3神经元形态及数量发生改变可能与自噬有关，但不存在偏侧化损伤的现象； 4、功能蛋白Gap-43参与了慢性应激对模型组大鼠海马CA1、CA3区神经细胞的影响过程，并出现不对称现象。
【学位授予单位】：浙江理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363

【参考文献】

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中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 桑倩;慢性应激对大鼠空间学习记忆影响机制的研究[D];浙江理工大学;2010年

本文编号：1161866