bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）真核表达载体的构建

发布时间：2017-12-08 02:31

  本文关键词：bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）真核表达载体的构建

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【摘要】：目的：人体受到外伤以后尤其是手外科和创伤骨科造成的外伤中的开放性伤口是毁灭性，神经断裂、血管坏死、韧带撕裂、肌肉坏死等等，手术治疗能解决神经的重建术、血管的移植术、韧带修复术、为防止肌肉的坏死或者感染外伤处防止VSD负压引流术，这些方面能解决开放性伤口很大的医学治疗性，但是对于术后患者恢复则是有很多局限性，所以对于上述的临床难题一直是学者或者研究人员不断探索我研究的重点，也是医学界未解决的诸多事件之一。由于科技不断的进展及人类医学的进步包括手术后对神经重建术后的恢复，韧带修复术的加强，血管移植术后的血管强化，这些年来人们都这些研究取得了很多的进步，也从本身的基础上有了更加深刻的认识。这样的话应用临床指导或者验证临床效果有很多的促进作用。相应的是由于诸多因素的影响及现代医学显微技术的进展速度限制，，周围神经损伤的术后尤其是针对外伤后神经损伤锐器损伤的话神经修复相对后期修复来说是恢复率及功能上有较好的效果。若是磨损性的神经挫断行神经缝合后神经远端及神经元的修复和后期恢复率上效果一般，所以对于神经、血管、软骨细胞以及对患者的恢复问题是外科系统非常重视的问题。 碱性成纤维生长细胞（简称bFGF）:由于当初医学的局限性，bFGF为1974年首次从牛神经细胞中纯化而来，随着显微医学的不断进展证实促进细胞及神经细胞生长作用的是很强的对肽因子，而且这个进步有很大的生物学作用，对多种细胞包括神经细胞的生长、分行及神经修复有很大的影响，并且在生理及病理中发挥一定的作用。它也是手外科、创伤骨科、周围外科领域中的信号调节因子之一，对神经元修复及神经细胞有促进作用。且它在周围神经损伤后，远端轴突和近端神经元胞体所发生的一系列反应。包括生长锥形成延伸、选择性粘附、神经营养因子上调、炎症反应、神经递质合成、神经元重塑、细胞运动、细胞外基质作用等方面。 本实验的目的：通过显微医学技术进行体外培养bFGF基因形成真核表达载体构建的过程，为下一步实验转染培养BMSCs提供可靠的实验学素材。 方法：（1）通过体外培养细胞再用RT-PCR获得bFGF的cDNA； （2）将连于bFGF基因片段的表达载体构建过程，通过实验方法观测其生理或者微量元素的表达及活跃性。为下一步实验的转染打下良好的实验学素材和动物实验基础。 结果：（1）成功获取bFGF的cDNA基因片段；（2）成功获取了稳定表达bFGF的构建过程，并通过RT-PCR技术、Westernblot进行了鉴定。 研究理论：通过体外培养细胞bFGF基因形成真核表达载体构建的过程，为下一步实验转染培养BMSCs提供可靠的实验学素材，为进行动物试验奠定了基础。
【学位授予单位】：长春中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R3416

【参考文献】

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1 路艳蒙,傅文玉,朴英杰,乔东访,安连兵;人骨髓间充质干细胞的超微结构[J];电子显微学报;2002年04期

2 陈惠;杨耀防;;bFGF的生物作用分子机制研究进展[J];九江医学;2009年01期

3 戴文达;方涛林;李熙雷;林红;董健;陈峥嵘;;人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定[J];复旦学报(医学版);2008年03期

本文编号：1264738