肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用

发布时间：2017-12-09 12:25

  本文关键词：肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用

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【摘要】：目的为建立肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)的DPO-PCR快速检测方法。方法本研究以EIECipaH基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸(DPO)引物,建立了EIEC DPO-PCR检测方法。结果退火温度范围在47℃~67℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与EIEC的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.17×102 cfu/mL。利用该检测方法对采集的230份样品进行检测,共计检出3份EIEC阳性样品,与国标法(GB 4789.6-2003)检测结果一致,显示了良好的实用性。结论该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。
【作者单位】： 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心;黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心;从化出入境检验检疫局;重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牛遗传育种研究室;辽宁医学院畜牧兽医学院;
【基金】：海南省社会发展科技专项(2015SF29) 国家质检总局科技项目(2013IK031,2013IK051,2015IK089) 重庆市科技计划项目(cstc2014yykfA80017) 海南省应用技术研究与开发专项项目(ZDXM20130025) 广东检验检疫局科技计划项目(2011GDK44,2013GDK04)~~
【分类号】：S852.61;R378.2
【正文快照】： 海南省社会发展科技专项(2015SF29);国家质检总局科技项目(2013IK031,2013IK051,2015IK089);重庆市科技计划项目(cstc2014yykfA80017);海南省应用技术研究与开发专项项目(ZDXM20130025);广东检验检疫局科技计划项目(2011GDK44,2013GDK04)Technology Research and Development

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1 孙永祥,金以森,毛建勋,陆扁,丁水军;福氏志贺菌4C亚型生物学特性研究及ipaH基因检测[J];中国卫生检验杂志;2005年05期

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本文编号：1270400