供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用

发布时间：2017-12-13 21:36

  本文关键词：供体年龄影响融合生长内皮祖细胞对平滑肌细胞表型转换及增殖迁移的作用

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【摘要】：目的:探讨老龄和年轻个体来源融合生长状态内皮祖细胞(EPCs)对血管平滑肌细胞(SMCs)表型转换以及增殖和迁移的调节作用。方法:脱臼处死1~2月龄、19~26月龄SD大鼠,应用含15%FBS的DMEM/F12培养基(含内皮细胞生长添加剂100 mg/L、肝素100 mg/L、青霉素、链霉素各1×105U/L)培养EPCs,取1~2月龄大鼠腹主动脉,组织块法培养血管SMCs,应用Di I-Ac-LDL与FITC-UEA-1荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光分别对EPCs和SMCs进行鉴定。建立细胞共培养体系,上室为融合生长状态的EPCs,下室为SMCs,实验分4组:(1)第3代SMCs(P3)组;(2)第4代SMCs(P4)组;(3)第4代SMCs与年轻大鼠来源EPCs共培养(P4YE)组;(4)第4代SMCs与老龄大鼠来源EPCs共培养(P4AE)组。Western blotting检测α-SM-actin和osteopontin蛋白的表达;[3H]-TdR掺入法检测SMCs增殖;细胞划痕实验检测SMCs的迁移能力。结果:与P3组相比,P4组的SMCsα-SM-actin表达显著下调,而osteopontin表达显著增强;P4YE组SMCs的α-SM-actin及osteopontin表达与P3组比较未见有显著差别;与P4组相比,年轻和老龄大鼠来源的EPCs均显著促进第4代SMCs的α-SM-actin和下调osteopontin的表达,抑制第4代SMCs的增殖和迁移;与老龄大鼠来源的EPCs相比,年轻大鼠来源的EPCs更能够显著延迟SMCs表型由收缩型向合成型转换,抑制SMCs增殖和迁移。结论:共培养融合生长状态的EPCs使血管SMCs表型转换延迟、抑制SMCs增殖和迁移,年轻大鼠来源的EPCs较老龄大鼠来源的EPC更显著延迟血管SMCs表型由收缩型向合成型转换,并具有更强的抑制血管SMCs增殖和迁移的能力。
【作者单位】： 成都军区昆明总医院临床实验科云南省干细胞与组织工程中心;第三军医大学新桥医院全军心血管疾病研究所;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81170316;No.81101158) “973”基础研究规划资助项目(No.2012CB518100)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 2第三军医大学新桥医院全军心血管疾病研究所,重庆430037)动脉粥样硬化等损伤性血管疾病病理变化主要表现为内皮再生延迟以及血管伤处平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)过度增生,导致新生内膜形成。大量研究证实内皮祖细胞(endothelial progen-itor cells,EPCs)参与血管损

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本文编号：1286676