硫化氢对新生鼠肾上腺髓质嗜铬细胞释放儿茶酚胺的影响及其机制研究

发布时间：2017-12-13 22:32

  本文关键词：硫化氢对新生鼠肾上腺髓质嗜铬细胞释放儿茶酚胺的影响及其机制研究

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【摘要】：研究背景 硫化氢(H2S)是一种重要的气体信号分子,其对细胞膜上多种离子通道有调控作用。肾上腺髓质嗜铬细胞(adrenal medulla chromaffin cells,AMCs)分泌的儿茶酚胺(catecholamine, CA)在应激反应中起到了至关重要的作用。CA参与出生阶段呼吸与心血管调节,帮助新生鼠适应子宫外的环境。我们先前的研究揭示了H2S可以通过抑制钙依赖型钾通道[IK(Ca) current]引起大鼠AMCs分泌CA。然而,H2S是否能触发NRACCs释放儿茶酚胺CA尚不清楚。在我们的研究中,我们使用碳纤维电极(cabon fiber electrode, CFE)安培法和全细胞记录膜片钳技术,探究了H2S能否引起新生鼠AMCs量子化释放CA以及H2S引起的新生鼠和成年鼠嗜铬细胞CA分泌的动力学差异。 材料和方法 实验选择0到7天的新生鼠三只,取出一共六个肾上腺,立即放入D-hanks溶液中。剪除肾上腺皮质,然后把髓质单独放在D-Hanks溶液中。然后将溶液中的髓质放入0.6ml混合酶液中(胶原酶I3mg/ml,牛血清白蛋白3mg/ml,DNA酶0.23mg/ml,透明质酸酶2.4mg/ml)37℃恒温消化20分钟。消化后,用200μl移液器将髓质吹散。最后,将细胞固定于盖玻片(用PLL处理过)上然后加入DMEM高糖培养基中(含10%FBS),暂时放入37℃恒温箱中。新生鼠的嗜铬细胞需要在12小时内使用。实验操作中,含有原代培养的细胞玻片需放入记录皿中,并且以1ml/min的速度用标准的细胞外液持续灌流。使用5微米的碳纤维电极检测新生鼠儿茶酚胺的释放。全细胞记录使用膜片钳放大器为Axon公司的700B型放大器,玻璃电极电阻为6-10MΩ。所有数据均采用均数±标准误表示,采用单因素方差分析比较多组间的差异,t检验比较两组间的差异,以P0.05为显著性差异界值。 结果 1.外源性硫化氢可以触发新生鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌儿茶酚胺。 2.外源性硫化氢通过抑制钙依赖性钾通道引起细胞膜去极化。 3.外源性硫化氢引起的新生鼠和成年鼠儿茶酚胺的量子释放有动力学的差异。表现在通过单个囊泡的释放,对比成年鼠而言,新生鼠的分泌量较少但是分泌速度较快。 结论 外源性的硫化氢可以直接引起新生鼠肾上腺髓质嗜铬细胞儿茶酚胺的量子化释放。相比较成年鼠而言,动力学分析显示新生鼠有较快的分泌时间和较少的分泌量。我们的研究结果提示硫化氢引起的新生鼠肾上腺髓质嗜铬细胞儿茶酚胺的释放可能会帮助新生鼠耐受低氧应激性的损伤。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R335

【共引文献】

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2 赵德安;刘君;黄倩;韩子明;;硫化氢在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的水平变化及其干预影响[J];中国当代儿科杂志;2013年10期

3 陈筱山;何选丽;朱丽娟;张华;冯飞;晏勇;;外源性硫化氢对原代神经元早老素1和β淀粉样蛋白的影响[J];第三军医大学学报;2013年19期

4 李佳蔚;张清友;高洁;金红芳;杜军保;;血清铁在鉴别儿童血管迷走性晕厥和体位性心动过速综合征中的意义[J];北京大学学报(医学版);2013年06期

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6 杨倩;李东豪;;硫化氢在DR发病机制中的保护作用及研究进展[J];国际眼科杂志;2014年01期

7 孙洪兆;赵术珍;鲁凯;侯丰田;韩佳秀;赵鹏飞;张兴梅;张丽;张雪;韩增晓;刘晴晴;刘雪联;;外源性硫化氢对骨骼肌疲劳的影响[J];中国畜牧兽医;2014年01期

8 朱丽娟;陈筱山;何选丽;戚韵雯;晏勇;;外源性硫化氢对高糖条件下原代神经元β淀粉样蛋白的影响[J];南方医科大学学报;2014年04期

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10 陈永增;黄先勇;孙晓楠;曾强;蔡君燕;王家宏;;白细胞内源性硫化氢产生速率与高血压及炎性因子的关系[J];中华保健医学杂志;2013年06期

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1 殷鹏;PI3K/Akt信号通路对人肝癌细胞中胱硫醚-γ-裂解酶基因表达调控的分子机制及其生物学功能的研究[D];复旦大学;2012年

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5 陈筱山;外源性硫化氢对原代神经元APP代谢BACE-1/PS1的影响及其机制研究[D];重庆医科大学;2013年

6 路雯;硫化氢对大鼠十二指肠运动的影响及其机制[D];山东大学;2013年

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5 林玉婷;HO-1/CO信号系统参与H_2S、β-CD-hemin和H_2诱导的黄瓜不定根发生[D];南京农业大学;2012年

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10 周舒;硫化氢对大鼠蝮蛇毒致急性肺损伤组织炎症细胞因子的影响[D];南华大学;2013年

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本文编号：1286862