铜绿假单胞菌中III型分泌系统受Rh1和PQS群体感应系统调节

发布时间：2018-01-08 10:33

本文关键词：铜绿假单胞菌中III型分泌系统受Rh1和PQS群体感应系统调节　出处：《西北大学》2009年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 铜绿假单胞菌是一种主要的机会致病菌,在宿主机体免疫低下的情况下可引起多种软组织的感染。由于它对许多抗生素具有很高的内在抗药性,这给目前临床上的治疗带来很大困难。在铜绿假单胞菌中,群体感应系统(Quorum sensing,QS)和Ⅲ型分泌系统(TypeⅢsecretion system,T3SS)与该菌的感染和致病均有很大关系,因此很有必要研究这两个系统间的调控关系。本文中我们通过基因敲除的方法破坏铜绿假单胞菌QS系统相关基因,并将T3SS相关基因exoS、exoY、exoT、exsD-pscA-L启动子-报道子luxCDABE融合体整合到野生型菌株及QS系统突变菌株的染色体组上,通过检测启动子活性,比较这些基因在不同菌株中的表达情况。研究结果表明,T3SS中的exoS与exoT在pqsR基因突变体中的表达有明显的增强,Rhl系统对这四种基因的表达具有抑制作用,而Las系统存在与否对T3SS基本没有影响。以上结果说明,铜绿假单胞菌中的Rhl系统和喹诺酮信号(Pseudomonas Quinolone Signal,PQS)系统对T3SS相关基因的表达具有重要的调节作用。另外,在实验室以前的研究中,构建了一个转座突变体库。在低于抑制浓度四环素存在的条件下,phzAl基因在很多突变体中的表达较野生型菌株而言均有一定程度的增加,这其中包括一个PA0011基因突变体,该基因可能编码一种2-羟基-十二烷酰转移酶(2-OH-lauroytransferase),这种酶与细菌细胞外膜的合成有关。在本文的研究中,我们构建了PA0011基因的敲除突变体,通过实验发现,PA0011突变株较野生型菌株对包括四环素在内的很多抗生素变得更加敏感。同时,低于抑制浓度的四环素和红霉素对PA0011基因的表达有明显的增强作用。除此之外,在低于抑制浓度四环素存在的条件下,lasI、lasR、rhlI、rhlR、pqsH、pqsR、rhlA、lasB等基因在PA0011突变株中的表达较野生型均有明显的增加。这一研究结果表明,PA0011基因与铜绿假单胞菌的QS系统及抗生素的易感性有很大关系,PA0011基因可能作为一种潜在的药物作用靶点来控制铜绿假单胞菌的感染过程。
[Abstract]:Pseudomonas aeruginosa is a major opportunistic pathogen that can cause multiple soft tissue infections when the host organism is immunocompromised . As it has a high intrinsic resistance to many antibiotics , it poses a great difficulty in the current clinical treatment . In this paper , the expression of exoS , exoY , exoT , exsD - pscA - L promoter in pqsR gene was significantly enhanced by gene knockout . In this paper , we constructed a mutant of PA11 gene , which may encode a 2 - hydroxy - dodecanyltransferase ( 2 - OH - dodecytransferase ) , which may encode a 2 - hydroxy - dodecanyltransferase ( 2 - OH - dodecytransferase ) .

【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R378

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