人绒癌SCID小鼠实验性肺转移模型的建立及其生物学特性的初步观察

发布时间：2019-07-25 10:39

【摘要】： 建立理想的绒癌肺转移动物模型是进行绒癌肺转移研究的重要基础之一。本研究通过经SCID小鼠尾静脉注入人绒癌细胞株JEG-3,籍此建立一种较为符合临床特征的人绒癌肺转移动物模型。 第一部分基于静脉注射肿瘤细胞的人绒癌SCID小鼠肺转移模型的建立 目的:建立一种较为符合临床特征的人绒癌肺转移动物模型,并探索成功建立模型的合适的细胞浓度。方法:将40只4-5周龄SCID小鼠随机分为4组(依注入的细胞浓度分为A组、B组、C组、D四组,每组各10只),将人绒癌细胞株JEG-3制成1×10~7细胞/ml,5×10~6细胞/ml,1×10~6细胞/ml三种浓度单细胞悬液。两种浓度的细胞悬液经SCID小鼠尾静脉注入。A组每只注入1×10~7细胞/ml浓度的细胞0.1ml;B组每只注入5×10~6细胞/ml浓度的细胞0.2ml;C组每只注入1×10~6细胞/ml浓度的细胞0.1ml;D组设为正常对照组。每三天观察一次小鼠状态,称量一次小鼠的体重,当小鼠处于濒死状态时用小动物成像CT系统检查肺部有无占位及数目,Micro CT检查后,脱椎处死SCID小鼠,全身解剖,肉眼观察各脏器有无肿瘤灶及双侧肺表面转移结节数量,标本制成病理切片显微镜下观察。结果:A组:尾静脉注射时全部死亡;B组:尾静脉注射时死亡3只;存活的7只在18±2天时,处于濒死状态;体重在接种JEG-3细胞后最初12天迅速上升,此后体重迅速下降;Micro CT检查,5/7肺部见到明显的占位,每只肺部占位灶1-3个,占位直径1.5-3.5mm;肉眼下1/5见肝脏转移灶,余SCID小鼠均未见其他脏器转移灶,均未查见胸、腹水;病理切片证实为绒癌。C组:尾静脉注射时死亡2只;存活的8只在30±2天时,处于濒死状态;体重在接种JEG-3细胞后在最初12天缓慢上升趋势此后体重逐渐下降:Micro CT检查肺部均未见到明显的占位;肉眼下,2/8于颈部皮下观察到5-10mm的紫蓝色的转移灶,其他脏器均未观察到转移灶,均未查见胸、腹水。D组小鼠的体重始终随时间成逐步上升趋势。结论:通过尾静脉注射JEG-3细胞可以成功地建立SCID小鼠人绒癌肺转移模型,5×10~6细胞/ml 0.2ml为建立模型的较为合适的细胞浓度、细胞数量。 第二部分SCID小鼠人绒癌实验性肺转移模型的生物学特性的初步观察 目的:初步观察SCID小鼠人绒癌实验性肺转移模型的生物学特性。方法;对荷瘤肺组织的病理切片的特异性的抗原β-HCG进行免疫组织化学技术检测,对新鲜的荷瘤肺组织进行原代培养,细胞纯化及传代,并记为JEG-3-LM细胞,对该细胞的特异性抗原β-HCG进行免疫组织化学技术检测,及对其染色体进行分析研究。结果:病理切片应用人绒癌标志物β-HCG进行染色,呈阳性反应。绒癌JEG-3-LM传至第5代,成纤维细胞基本去除,目前传至第15代;JEG-3-LM呈单层上皮样生长,细胞形态呈典型的上皮样细胞,平均三四天传一代。应用人绒癌标志物β-HCG进行染色,JEG-3-LM细胞全部呈阳性反应。JEB-3-LM染色体核型分析为人源性单体、三体和多体染色体,细胞染色体数目19-128条,染色体众数70-79条。结论:JEG-3-LM细胞为人源性绒癌细胞。 总之本研究以人绒癌细胞系JEG-3为研究材料、以SCID小鼠为宿主动物,经尾静脉注射肿瘤细胞成功地建立人绒癌SCID小鼠肺转移模型,并对该模型的生物学特性进行了初步观察。目前在文献中尚未见到以SCID小鼠为宿主动物,通过尾静脉注射肿瘤细胞建立实验性绒癌肺转移模型的报道。
【图文】：

图2SCID小鼠接种JEG一3细胞后体重变化侧小动物CT成像系统检查双肺转移灶情况B组:7只中5只见到明显的占位，每只肺部占位灶1一3个，占位直径1.5一3.smfn(图3)。C组:8只中均未见到明显的占位。

图3SCID小鼠肺部CT身解剖后肺脏转移情况和其他脏器转的7只小鼠中5/7肉眼卜见紫蓝色的度)，1一3个肺转移灶/只，，直径3一Slnln囊性区，囊性区内含陈旧性咖啡色液体的8只小鼠中肉眼下均未观察到肺部
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R-332;R737.33

【参考文献】

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1 姚开泰,潘世[

本文编号：2519036