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逆转录环介导等温扩增检测人星状病毒1型

发布时间:2019-11-10 18:42
【摘要】:目的:建立一种快速检测人星状病毒1型的逆转录环介导等温扩增方法。方法:针对人星状病毒ORF1a序列设计特异引物,并优化反应条件。对1株人星状病毒1型实验株和7株其他肠道病毒对照株,及80份临床粪便标本进行检测,并与RT-PCR法比较,确定该方法的特异性、灵敏性和实用性。结果:60℃反应需时1.5h,可通过肉眼目测或电泳检测判定结果。该方法特异性较好,粪便标本中人星状病毒1型检出限为5pg/管。临床粪便标本检测结果与RT-PCR法一致。结论:本方法实用性强,有望用于人星状病毒1型现场监测和流行病学调查。
【图文】:

扩增产物,肉眼观察,产物,图注


阳性;2,阴性对照;3,空白对照图2 RT-LAMP 扩增产物 SYBR Green I 染色肉眼观察图注:M,marker;1,产物酶切前;2,产物酶切后;N,,RT-LAMP 阴性对照;N′,酶切阴性对照图3 HAstV-1 RNA RT-LAMP 扩增产物和酶切电泳分析bpM 1 N N′ 2244 bp225 bp206 bp1 000700500400300200100


本文编号:2558983

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