制作诱导多能干细胞饲养层细胞最佳条件的研究

发布时间：2019-11-20 07:13

【摘要】：诱导多能干细胞(IPS)是近年来研究的热门,而IPS细胞体外培养需要饲养层细胞。小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)可分泌白血病抑制因子,作为IPS细胞的饲养层细胞。目的建立分离培养小鼠胚胎成纤维细胞的体系,制作高质量的IPS饲养层细胞。方法选妊娠11.5~15.5d的昆明小鼠制作MEF细胞,选择第三代MEF细胞用不同浓度丝裂霉素C处理,制作饲养层细胞,在饲养层细胞上接种IPS细胞,观察各组IPS细胞生长状态并计算克隆数目。结果妊娠第13.5天的胚胎制作的MEF,经10μg/ml的丝裂霉素C处理3h的饲养层细胞状态较好,其IPS生长状况最好,克隆数目和质量最佳。结论不同胎龄胚胎分离的MEF可用做IPS饲养层,第13.5d的胚胎分离的MEF细胞经10μg/ml的丝裂霉素C处理3h制成的饲养层细胞最适于IPS细胞生长。

【共引文献】

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