关于低能冲击波对T淋巴细胞的作用及其作用机理的探讨

发布时间：2020-03-23 09:39

【摘要】：冲击波是压力急剧变化的产物，能在几纳秒内达到它的压力最大值。冲击波的负相波段可引起空化反应。冲击波产生的快速上升的正相压力波和空化反应引起的微泡爆炸喷射会促使被作用物体表面的张力增加。一定的张力作用可使物体发生破裂。由于其这一特性，长期以来，高能冲击波一直被用于体外治疗泌尿系统的结石，并且取得了良好的疗效。近年来人们发现，低能冲击波对骨折愈合有促进作用，并且将冲击波应用到骨不连的治疗中，结果显示冲击波对肥大型骨不连治愈率几乎达到100%，对营养不良型骨不连的疗效不理想，这和手术治疗的结果相似。同时欧洲人又将冲击波用于慢性肌腱炎的治疗，如治疗肱骨外上髁炎、足底筋膜炎和钙化性肌腱炎等，也取得了理想疗效，与传统的非手术疗法相比，冲击波疗效更巩固，和手术治疗相比没有统计学上的差异。这样关于低能冲击波的应有基础研究开始展开。早在1986年Haupt就发现低能冲击波可促进小猪的创口愈合，而加大冲击波的强度则会抑制创口的愈合；形态学上的观察显示：低能冲击波会使小猪创口内的毛细血管、新生上皮细胞和巨嗜细胞的数量明显增加，是对照组的二倍。中国台北的Wang发现，能损伤细胞膜但不损伤其它细胞器的低能冲击波可诱导人骨髓间质干细胞向骨原细胞分化并诱导骨小节形成。 那么，为什么低能冲击波能产生如此的生物学效应呢？对细胞产生一定应力和应变的机械刺激，会引起细胞内的ATP快速释放。一旦ATP被释放到细胞外的环境中，其会与表达在几乎所用哺乳动物细胞膜表面的P2X和/或P2Y受体相互作用，激活细胞内的传导路途经，调节细胞的功能和代谢。同时ATP的代谢产物（腺苷adenosine）也和细胞表面的P1受体相互作用。这样细胞外的ATP和其代谢产物通过它们的受体，对T淋巴细胞的功能产生很强的影响：ATP可促使小鼠的胸腺细胞增殖，，ATP和腺苷将会抑制/或增强由T淋巴细胞受体激活的信号传导、细胞凋亡或胸腺细胞分化。 冲击波会对细胞表面产生一定的应力和应变的机械刺激。如果能损伤细胞膜而不损伤其它细胞器的低能冲击波作用T淋巴细胞，将会产生什么样的影响呢? 该低能冲击波能否引起细胞内的ATP快速释放？释 WP=99 放到细胞外的ATP是否通过激活P2受体，引起相应的生物学效应呢？关于这方面的研究，国内外未见报道。 另外，有丝分裂原激活蛋白激酶p38 （p38 MAPK）结构上和酵母菌的压力敏感蛋白HOG-1（the products of Saccharomyces cerevisiae osmosensing gene)蛋白相似。在受到高渗透压作用时，酵母菌细胞通过HOG-1蛋白调节基因表达。高渗透压或机械刺激作用可使人T淋巴细胞的p38 MAPK被激活，促进T淋巴细胞分泌IL-2。这样我们不禁要问：是否低能冲击波通过激活 p38 MAPK，对T淋巴细胞的功能产生影响？关于这方面的研究，国内外未见报道。 为了检验这一假说，我们用Balb/c小鼠的脾细胞和人外周血单个核细胞（PBMC）来研究低能冲击波对T淋巴细胞增殖的影响。用人外周血单个核细胞（PBMC）和人Jurkat T细胞来研究低能冲击波对T淋巴细胞的信号传导和分泌IL-2的影响。 研究目的： 研究低能冲击波是否促进T淋巴细胞增殖及分泌IL-2；研究低能冲击波是否通过激活细胞内的有丝分裂原激活蛋白激酶p38（p38 MAPK）增强激活的T淋巴细胞增殖及分泌IL-2；探讨是否细胞内ATP向外释放是低能冲击波影响T淋巴细胞的信号传导和功能的潜在机理。 材料和方法： 研究低能冲击波是否能促进T淋巴细胞增殖及分泌IL-2 先将Balb/c小鼠脾细胞、PBMC或Jurkat T细胞，用0.18mJ/mm2的低能冲击波分别作用0、100、150、200、250、300、320、360和420次。之后再立即用刀豆蛋白A(ConA)的亚刺激量作用Balb/c小鼠脾细胞，植物血凝素（PHA)的亚刺激量作用PBMC，或抗-CD3及抗-CD28抗体的亚刺激量作用Jurkat T细胞，同时设阴性对照组。继续放入5%CO2,37℃孵箱，继续培养48小时，用3H-TdR掺入法检测低能冲击波对激活的T淋巴细胞增殖的影响；或继续培养24小时，用生物活性分析法通过CTLL-2细胞检测低能冲击波对T淋巴细胞分泌IL-2的影响。 研究p38 MAPK在低能冲击波促进T淋巴细胞的增殖和分泌IL-2的作 WP=100 用 预先用p38 MAPK抑制剂( SB203580/20uM)和PBMC或Jurkat细胞37°C孵育箱共育1小时，再用冲击波和PHA或抗-CD3/抗-CD28抗体的亚刺激量作用，之后48小时用PBMC检测低能冲击波对激活的T淋巴细胞增殖的影响，或24小时用Jurkat细胞检测低能冲击波对T淋巴细胞分泌白细胞介素-2(IL-2)的影响。设无上述拮抗剂和抑制剂的阴性对照组。通过用免疫印迹法（Western Immunoblotting），用抗- p38MAPK抗体及抗-磷酸化的p38MAPK(Thr180/Tyr182)抗体，测定Jurkat T细胞上的p38 MAPK的表达及磷酸化。 研究是否细胞内ATP向外释放是低能冲击波影响T淋巴细胞的信号传导和功能的潜在机理 用人Jurkat T细胞通过ATP荧光试剂盒来检测低能冲击波是否引起T细胞分泌ATP。预先用P2X7受体的拮抗剂（KN-62/0.1uM）、P2受体的拮抗剂(suramin/200uM)、p38MAPK抑制剂( SB203580/0-50uM)或Ca2+螯合剂(EGTA/2mM) 和PBMC或Jurkat细胞37°C孵育箱共育1小时，之后用PBMC检测低能冲击波对激活的
【图文】：

林大学博士学位论文 关于低能冲击波对 T 淋巴细胞的作用及其作用机理的探Research on the effects of low-density shockwaves on T cells and their biologic mechan
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R392

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李爱莲;大鼠淋巴结T淋巴细胞亚群的免疫电镜标记[J];第三军医大学学报;1993年04期

2 周忠海;IFN-γ能显著减少正常人记忆/效应CD8~+ T淋巴细胞[J];国外医学.免疫学分册;2000年05期

3 张应玖,金宁一,殷震,沈家骢;HIV的致病机制研究进展[J];微生物学杂志;2000年01期

4 杜楠;李留树;肖文华;唐卓斌;孙同柱;;二硝基氟苯修饰的黑色素瘤细胞激活树突状细胞诱导特异性T细胞反应[J];生物技术通讯;2006年04期

5 陈恕求;陈明;张古田;李俊龙;彭涛;孙则禹;;T淋巴细胞在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用[J];中国实验动物学报;2007年01期

6 杨志;曾耀英;黄秀艳;滕菲;李林;宋兵;姚满林;;红车轴草提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响[J];暨南大学学报(医学版);2007年06期

7 宋正海;;关于高中生物学中T细胞知识的诠释[J];生物学通报;2009年02期

8 王维义 ,陈少波;油菜蜂花粉对大鼠T淋巴细胞转化的影响[J];浙江大学学报(理学版);1987年02期

9 顾晨;T淋巴细胞可杀灭AIDS感染细胞[J];现代免疫学;1988年02期

10 周钢,刘胜武,张秋萍,熊洁,蒋丽,谭锦泉;皮肤归巢T淋巴细胞的趋化性及趋化因子受体的表达[J];武汉大学学报(医学版);2004年03期

相关会议论文 前10条

1 段连宁;李江琪;杜江;潘兴华;郭坤元;;优势化Ⅱ型T淋巴细胞制备及其免疫功能研究[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年

2 沈晖;鲁静;方秀斌;肖卫国;赵丽娟;;有丝分裂原激活蛋白激酶(p38)在佐剂关节炎大鼠滑膜及肺组织中表达[A];首届全国中青年风湿病学学术大会论文汇编[C];2004年

3 沈晖;鲁静;肖卫国;赵丽娟;方秀斌;;有丝分裂原激活蛋白激酶(p38)在佐剂关节炎大鼠滑膜及肺组织中表达[A];全国自身免疫性疾病专题研讨会暨第十一次全国风湿病学学术年会论文汇编[C];2006年

4 刘爵;韦莉;姚炜光;张方亮;周蛟;王平;佘锐萍;刘伟;刘尚高;;超强毒感染后SPF鸡免疫器官中CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞的动态分布[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年

5 刘藕根;何黎;;小鼠体内T淋巴细胞及IL-10对光变态反应性接触性皮炎影响的实验研究[A];2003中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2003年

6 郑琦涵;岳茂兴;李瑛;;严重多发伤患者早期全血中T淋巴细胞变化的临床研究[A];第五届全国灾害医学学术会议暨常州市医学会急诊危重病及灾害医学专业委员会首届年会学术论文集[C];2009年

7 田志刚;张建华;王郡甫;张彩;孙内;;T淋巴细胞清除术促进脐血造血细胞的体外扩增[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年

8 王飞;Griffiths CEM Kirby B Cameron AL;;自然杀伤细胞和T淋巴细胞在银屑病发病中作用的研究[A];2002中国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2002年

9 陈同辛;朱亚忠;郝轶群;曹清;应大明;;粘附分子CD44的表达及抗血液肿瘤免疫效应的研究[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

10 杨永红;李惠芳;朱平;;从一例慢性嗜酸粒细胞白血病发现克隆性增殖T淋巴细胞[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年

相关重要报纸文章 前10条

1 王雪飞;再说免疫反应[N];健康报;2003年

2 刘永铭;T淋巴细胞加重动脉粥样硬化[N];中国中医药报;2003年

3 张桀;人体免疫系统在太空是否依旧“勤奋”[N];大众科技报;2002年

4 彭萍;抗癌“隐士”——T细胞[N];大众卫生报;2004年

5 袁医;为何年老易患感染性疾病[N];卫生与生活报;2003年

6 储国强 王坤;我国科学家培育出杀灭肿瘤的细胞[N];中国水利报;2000年

7 ;艾滋病诊疗指南[N];中国医药报;2005年

8 ;艾滋病诊疗指南（一）[N];中国中医药报;2005年

9 高书明;抗癌隐士——T细胞[N];中国中医药报;2004年

10 杨春;睡眠提高你的免疫力[N];中国医药报;2000年

相关博士学位论文 前10条

1 于铁成;关于低能冲击波对T淋巴细胞的作用及其作用机理的探讨[D];吉林大学;2004年

2 马驰;小鼠小肠上皮细胞间淋巴细胞（iIEL）与脾T淋巴细胞间基因表达差异的分析与iIEL功能初步研究[D];中国协和医科大学;2002年

3 仇子龙;细胞分裂与细胞分化的关系及分化表达基因的染色体定位分析[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2003年

4 罗军;NF-κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用研究[D];第三军医大学;2004年

5 张剑军;热休克蛋白70、90α在胃癌组织中表达及热休克蛋白70、90α多肽复合物疫苗抗肿瘤作用的实验研究[D];中国医科大学;2004年

6 樊超;可诱导共刺激分子在白塞病免疫病理过程中的作用机制[D];华中科技大学;2007年

7 曼淑梅;阿尔茨海默病人外周血T淋巴细胞穿过血脑屏障的机制[D];中国医科大学;2004年

8 孟筱坚;同种异体反应中产生IFN-γ细胞的研究及其在急性移植物抗宿主病中的应用[D];浙江大学;2005年

9 陈一鸣;T淋巴细胞识别自体慢性髓系白血病细胞肿瘤抗原的研究[D];中国协和医科大学;1996年

10 李红;小鼠间充质干细胞抑制急性移植物抗宿主病的机制[D];中国人民解放军军事医学科学院;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 梁霄;T淋巴细胞和血管内皮细胞在外阴白色病变发病中作用的初步探讨[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年

2 杨庆永;系统性红斑狼疮患者T淋巴细胞TCR/CD3复合物介导的信号传导的研究[D];第一军医大学;2000年

3 王志睿;钩吻素子对小鼠Th细胞因子分泌及胞内钙水平影响的研究[D];第一军医大学;2005年

4 李少英;服用二十八烷醇对自行车运动员免疫功能的影响[D];山东师范大学;2007年

5 张凯辉;消银解毒饮对银屑病血热证外周血淋巴细胞调控作用研究[D];北京中医药大学;2009年

6 赵勇;心理干预对围手术期乳腺癌患者情绪及T淋巴细胞亚群影响的研究[D];吉林大学;2007年

7 方军;CD3和CD28双刺激活化的健康人外周血T淋巴细胞与胃泌素拮抗剂合用对结直肠癌细胞杀伤作用的研究[D];第四军医大学;2007年

8 刘欣彤;心理行为干预与卵巢癌患者情绪及T淋巴细胞亚群的动态变化研究[D];重庆医科大学;2008年

9 刘迎嘉;宫颈癌中树突状细胞和T淋巴细胞的表达及意义[D];新疆医科大学;2007年

10 陈铭佳;脾虚证动物模型的差异性研究[D];黑龙江中医药大学;2005年

本文编号：2596543