衰老小鼠T淋巴细胞凋亡抗性机理与枸杞多糖对其调控的研究以及T淋巴细胞死亡方式的探讨

发布时间：2020-04-24 21:23

【摘要】：第一部分衰老过程中伴有生理功能的下降和感染、恶性肿瘤以及自身免疫性疾病发病率的增加。近年来，许多研究者提出细胞凋亡的改变与这些年龄相关性疾病的发生密切相关。但是，对于衰老过程中凋亡是如何改变的，以及衰老如何影响凋亡的调控机制，人们还知之甚少。哺乳动物细胞中的凋亡通路主要有两种：一种是细胞表面死亡受体介导的细胞凋亡通路(细胞外通路)，另一种是以线粒体为核心的细胞凋亡通路(细胞内通路)。有关凋亡在衰老T细胞中的变化目前尚无定论。本研究选用C57／BL6小鼠脾脏T淋巴细胞为研究对象，，通过IL-2与ConA联合刺激诱导T细胞凋亡，来观察青年(2月龄)与老年(26月龄)小鼠T淋巴细胞凋亡信号通路的差异，以阐明后者产生凋亡抗性的机理。结果发现，IL-2(10ng／ml)与ConA(6μg／ml)联合刺激6，16，32h后，老年小鼠T细胞的凋亡率分别为19.0±3.7％，35.9±5.9％，52.0±6.9％，明显低于青年T细胞的29.4±7.5％，65.6±6.4％，82.3±8.7％(n=3，p0.05)；与青年T细胞相比，ConA刺激后老年T细胞Th2类细胞因子(IL-4)的表达增加，而Th1类细胞因子(IL-2)的表达减少：Western Blot分析细胞凋亡信号通路相关蛋白发现，老年T细胞表面IL-2Ra、FasL的表达量在未受刺激和刺激后均比青年T细胞低，而FLIP在rnRNA和蛋白水平表达都增高；此外，IL-2与ConA联合刺激后，老年T细胞内NF-κB的表达水平和PARP的切割要比青年T细胞中低，而Survivin的表达量则比青年T细胞中高；同时，用罗丹明123检测线粒体膜电位发现，老年T细胞的线粒体膜电位总体要低于青年T细胞，青年T细胞在刺激0.5h后，线粒体膜电位即开始显著下降，而老年T细胞要在2h后膜电位才开始明显下降，说明刺激后老年T细胞线粒体膜电位下降要比青年T细胞慢。因此，在IL-2与ConA刺激导致的细胞凋亡中，老年小鼠T细胞由于IL-2Rα和NF-κB表达相对较低，使得Fas-FasL信号通路较青年T细胞中要弱，导致凋亡抑制蛋白FLIP在mRNA和蛋白水平的表达升高，促凋亡蛋白FasL表达下降：此外，由于凋亡抑制蛋白Survivin较青年小鼠表达量高，且老年小鼠线粒体的功能发生变化(线粒体膜电位降低较慢)，以及由于老年小鼠T细胞向Th2型转变，老年T细胞在IL-2／ConA刺激导致的细胞凋亡中表现出凋亡抗性。第二部分淋巴系统中，T淋巴细胞的发育及功能发挥与细胞凋亡密切相关。本室以往的研究证明：以C57BL／6J小鼠脾T淋巴细胞为对象，通过IL-2和conA
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R285;R392

【引证文献】