IL-10及吗啡对免疫细胞内硫氧还蛋白的调节

发布时间：2020-08-28 14:55

　　 硫氧还蛋白(Trx)是一种广泛表达于多种生物的小分子蛋白质。它与Trx还原酶及NADPH组成了Trx系统。虽然Trx具有多种生理功能,但其最基本的功能是通过其活性位点(Cys-Gly-Pro-Cys)调节体内氧化还原平衡及抗氧化损伤。硫氧还蛋白结合蛋白2(TBP-2)则是一种Trx的负调节蛋白。它能抑制Trx的氧化还原调节活性并能下调Trx的表达量。 随生物学的发展,氧化还原调节在细胞信号传导中的作用已成为研究的热点之一。而且已有大量的研究显示,氧化还原调节在免疫应答反应中有重要作用。虽然Trx系统只是人体内多种抗氧化分子系统(如Cys、谷光苷肽、超氧化物岐化酶)中的一种,但已经有研究显示Trx直接参与了免疫反应的调节。然而,目前对于Trx的免疫调节作用还没有完整统一的认识,主要原因之一是免疫系统网络的复杂性(包括免疫细胞的多态性)。 由于Trx在免疫应答反应中有一定的作用(如先前一些报道所提示的抑制炎症作用),本论文主要研究了Trx与白介素10(IL-10)的相关性。其次,本论文还研究了吗啡刺激对小鼠脾脏Trx表达的调节作用。 本研究主要通过RT-PCR和蛋白质免疫印迹分析,检测了Jurkat细胞(一种CD4+T细胞)和U937细胞(一种单核细胞)在IL-10作用下的胞内Trx表达变化,以及吗啡对小鼠脾脏组织Trx表达的影响。 定量PCR结果显示：在选择的时间内(6 h、12 h、16 h),IL-10的加入轻微上调了Jurkat细胞的Trx mRNA水平,同时下调了TBP-2 mRNA水平。蛋白质检测说明IL-10作用16h后诱导Jurkat细胞的Trx表达,而P13K抑制剂能部分阻断这种诱导作用。 此外,在U937细胞培养物中加入IL-10(终浓度为20 ng/ml)后,U937细胞的胞内Trx表达在一些时间点(1h、4h、16 h)明显下降。在16h作用时间的实验中,在预先加入P13K抑制剂的情况下,IL-10对U937细胞Trx表达的抑制作用几乎被阻断。 最后,吗啡调节小鼠脾脏Trx表达的研究显示：在急性吗啡给药时,雄性昆明种小鼠脾脏的Trx表达被抑制,而雌性小鼠则有相反的表现。在慢性吗啡给药时,雄性C57BL/6鼠脾脏的Trx表达被抑制。
【学位单位】：昆明理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R392
【部分图文】：

图1.IJ’rX的蛋白质分子一级结构Fig1.1.PrimarystructureofTrxProtein:图中显示了人Trx的实际氨基酸序列(从N端到C端)。图中2个箭头所指位点及它们之间的位形成Trx80的潜在切割位点区域。

图1.2Trx的X射线品体衍射结构图Fig1.2TheerystalstruetureofTrXbyXraydiffraetionanalysis能体外进行的电泳迁移率分析说明:AP一1、NF一KB、Myb、Ets等核因子的DNA结合

图1.3Trx进行氧化还原调节的示意图Fig1.3SketehmaPofredoxregulationbyTrX通过外源加入Trx(20群岁ml)，或者转染Tix表达质粒，都能显著增强细胞的AP一1活

【共引文献】

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本文编号：2807718