内毒素和过氧化氢损伤C6细胞线粒体氯通道蛋白及其凋亡相关蛋白的变化

发布时间：2020-10-12 06:32

　　 目的:观察内毒素(LPS)和过氧化氢(H2O2)诱导的神经胶质瘤C6细胞损伤的影响。方法:紫外分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率;原位末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡率;RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达;Western blotting检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、细胞色素C(Cyt-C)及CLIC4的蛋白水平。结果:与对照组相比,LPS组C6细胞凋亡率及LDH释放率增加(p﹤0.05);Bcl-2、Bax表达未见明显差异,Caspase-3表达增强,CLIC4蛋白水平及胞浆Cyt-C未见明显变化。H2O2组C6细胞凋亡率及LDH释放率增加(p﹤0.05);Bcl-2表达下降,Bax、Caspase-3、CLIC4蛋白水平明显增强。与H2O2组相比,LPS与H2O2联合作用于C6细胞,细胞凋亡率及LDH释放率明显增加(p﹤0.05);Bcl-2表达下降,Bax、Caspase-3、胞浆细胞色素C表达增强,CLIC4蛋白水平变化不明显。结论:LPS和H2O2能够诱导细胞凋亡,其效果具有相加作用,提示LPS和H2O2能够增强细胞的损伤,其机制与Bcl-2表达下降,Bax、Caspase-3表达上调有关。CLIC4主要参与了细胞氧化损伤的过程,可能未参与内毒素引起细胞损伤机制。
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2008
【中图分类】：R363
【文章目录】：
提要
英文缩写词表
第一章 文献综述
    1. 内毒素的生物学功能
    2. 过氧化氢与细胞凋亡
    3. 氯通道家族及CLIC4
第二章 材料与方法
    第一节 主要材料
    第二节 实验方法
        一、神经胶质瘤C6细胞培养
        二、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）活性测定
        三、原位末端标记技术检测细胞凋亡
        四、RT-PCR 检测 Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表达
        五、RT-PCR 检测 Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表达 1.细胞总蛋白的提 取
        六、Weaternblot 检测胞浆蛋白 Cyt-C 蛋白的表达
        七、统计学处理
第三章 结果
2O₂ 对 C6 细胞的 LDH 释放率的影响'>    1. LPS 和H₂O₂ 对 C6 细胞的 LDH 释放率的影响
2O₂ 作用的 C6 细胞凋亡率'>    2. TUNEL 法检测 LPS 和 H₂O₂ 作用的 C6 细胞凋亡率
2O₂对C6 细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表达的影响'>    3. LPS 和H₂O₂对C6 细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表达的影响
2O₂ 对C6 细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、CLIC4 及胞浆蛋白 Cyt-C 蛋白表达的影响'>    4. 4LPS 和H₂O₂ 对C6 细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3、CLIC4 及胞浆蛋白 Cyt-C 蛋白表达的影响
第四章 讨论
结论
参考文献
中文摘要
Abstract
致谢
导师及作者简介

【共引文献】

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本文编号：2837788