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糖基化终产物对胚胎植入孕鼠子宫内膜功能和胚胎着床能力的影响

发布时间:2020-10-15 06:18
   目的:探讨肥胖相关的晚期糖基化终产物对胚胎植入孕鼠内膜功能和胚胎着床能力的影响。方法:选取30只雌性BABL/c小鼠,将其随机分为3组,即模型5 W组、模型10 W组及正常组,每组10只。采用高脂饲料喂养模型组小鼠,构建肥胖模型;正常组喂养与模型组等量的普通饲料。在造模后对小鼠进行植入胚胎。20 d后眼球取血检测各项指标,应用RT-PCR以及Western blotting检测基因和蛋白表达量。结果:在造模10周后,正常组小鼠的体质量基本不变;模型10 W组在第3、5和7周,模型5 W组在第5和7周与正常组相比体质量变化差异均具有统计学意义(P0.05)。血浆胆固醇、三酰甘油、血糖、胰岛素含量模型5、10 W组与正常组相比差异均有统计学意义(P0.05)。正常组胚胎存活率整体无太大差异,而模型10 W组由原来的存活93粒最终降低为25粒,在妊娠第10、20天模型组的胚胎存活率与正常组相比差异均有统计学意义(P0.05)。与正常组比较,模型5、10 W组组织中的RAGE基因表达量呈增高趋势,HOXA10基因表达量呈下降趋势;RAGE蛋白表达量呈增高趋势,HOXA10、P/CAF、FKBP52、PTEN蛋白表达量呈下降趋势。结论:肥胖相关的晚期糖基化终产物是通过影响RAGE受体的表达,进而影响小鼠胚胎着床重要蛋白的表达,最终影响胎盘植入孕鼠内膜功能和胚胎着床能力。
【部分图文】:

基因表达,情况


表5RT-PCR过程中引物序列(n=10)基因前引(5'-3')后引(5'-3')长度/bpHOXA10CAAAGATGACTGTCAGCTGCATTTGCTTGGTCTCTAAGCAT153RAGEGCATTGTTTCCGCGCTAGGTGGCCTAGTGGAATCTGTAGAA142p/CAFGAGATCTGACTTAATCGTCTCAGTCGATCCATGCTCGCTCGTA131β-actinCGTAGTGCTGTAGCCAGGAACGGTCATACATGGAGAGGCA126图1RT-PCR法检测RAGE基因表达情况图2RT-PCR法检测P/CAF和HOXA10基因表达情况图3Westernblotting法检测RAGE和p/CAF受体蛋白表达情况图4Westernblotting检测HOXA10和FKBP52蛋白表达情况图5Westernblotting检测PTEN蛋白表达情况运动量的减少,肥胖问题比以往任何时候都更为突出。本实验通过研究肥胖与胚胎着床率的关系[14-15],以期找到不孕不育的辅助治疗方法。本实验通过摄入高脂饲料来构建肥胖模型,并以小鼠的体质量、血浆中胆固醇、三酰甘油、血糖和胰岛素来作为造模是否成功的评判标准。胚胎存活率结果显示,正常组的胚胎存活率前后无太大差异,而模型10W组由原来的存活93粒最终降低为25粒。以上结果初步证实肥胖对植入孕鼠的胚胎存活率有显著影响。糖基化终产物会使人体衰老加快[16-17],除此之外,其也和慢性疾病产生有关。HOXA10是介导FK-BP52的信号分子之一,在HOCXA10基因敲除的小鼠细胞中,FKBP52蛋白会发生下调作用。本实验RT-PCR和Westernblotting检测结果均显示,与正常组比较,模型5、10W组组织中RAGE蛋白表达量呈现增高的趋势,HOXA10蛋白表达量呈现下降的趋势。这可能与胚胎着床有关系。p/CAF是重要的组蛋白转移酶,催化核心组蛋白的乙酰化,存在于子宫内膜的基质细胞中,促进相关基因转录。Rustandi等[18-19]研究证实,p/CAF是HOXA10

胚胎着床,组蛋白,不孕不育,糖基化终产物


表5RT-PCR过程中引物序列(n=10)基因前引(5'-3')后引(5'-3')长度/bpHOXA10CAAAGATGACTGTCAGCTGCATTTGCTTGGTCTCTAAGCAT153RAGEGCATTGTTTCCGCGCTAGGTGGCCTAGTGGAATCTGTAGAA142p/CAFGAGATCTGACTTAATCGTCTCAGTCGATCCATGCTCGCTCGTA131β-actinCGTAGTGCTGTAGCCAGGAACGGTCATACATGGAGAGGCA126图1RT-PCR法检测RAGE基因表达情况图2RT-PCR法检测P/CAF和HOXA10基因表达情况图3Westernblotting法检测RAGE和p/CAF受体蛋白表达情况图4Westernblotting检测HOXA10和FKBP52蛋白表达情况图5Westernblotting检测PTEN蛋白表达情况运动量的减少,肥胖问题比以往任何时候都更为突出。本实验通过研究肥胖与胚胎着床率的关系[14-15],以期找到不孕不育的辅助治疗方法。本实验通过摄入高脂饲料来构建肥胖模型,并以小鼠的体质量、血浆中胆固醇、三酰甘油、血糖和胰岛素来作为造模是否成功的评判标准。胚胎存活率结果显示,正常组的胚胎存活率前后无太大差异,而模型10W组由原来的存活93粒最终降低为25粒。以上结果初步证实肥胖对植入孕鼠的胚胎存活率有显著影响。糖基化终产物会使人体衰老加快[16-17],除此之外,其也和慢性疾病产生有关。HOXA10是介导FK-BP52的信号分子之一,在HOCXA10基因敲除的小鼠细胞中,FKBP52蛋白会发生下调作用。本实验RT-PCR和Westernblotting检测结果均显示,与正常组比较,模型5、10W组组织中RAGE蛋白表达量呈现增高的趋势,HOXA10蛋白表达量呈现下降的趋势。这可能与胚胎着床有关系。p/CAF是重要的组蛋白转移酶,催化核心组蛋白的乙酰化,存在于子宫内膜的基质细胞中,促进相关基因转录。Rustandi等[18-19]研究证实,p/CAF是HOXA10

胚胎着床,组蛋白,不孕不育,糖基化终产物


表5RT-PCR过程中引物序列(n=10)基因前引(5'-3')后引(5'-3')长度/bpHOXA10CAAAGATGACTGTCAGCTGCATTTGCTTGGTCTCTAAGCAT153RAGEGCATTGTTTCCGCGCTAGGTGGCCTAGTGGAATCTGTAGAA142p/CAFGAGATCTGACTTAATCGTCTCAGTCGATCCATGCTCGCTCGTA131β-actinCGTAGTGCTGTAGCCAGGAACGGTCATACATGGAGAGGCA126图1RT-PCR法检测RAGE基因表达情况图2RT-PCR法检测P/CAF和HOXA10基因表达情况图3Westernblotting法检测RAGE和p/CAF受体蛋白表达情况图4Westernblotting检测HOXA10和FKBP52蛋白表达情况图5Westernblotting检测PTEN蛋白表达情况运动量的减少,肥胖问题比以往任何时候都更为突出。本实验通过研究肥胖与胚胎着床率的关系[14-15],以期找到不孕不育的辅助治疗方法。本实验通过摄入高脂饲料来构建肥胖模型,并以小鼠的体质量、血浆中胆固醇、三酰甘油、血糖和胰岛素来作为造模是否成功的评判标准。胚胎存活率结果显示,正常组的胚胎存活率前后无太大差异,而模型10W组由原来的存活93粒最终降低为25粒。以上结果初步证实肥胖对植入孕鼠的胚胎存活率有显著影响。糖基化终产物会使人体衰老加快[16-17],除此之外,其也和慢性疾病产生有关。HOXA10是介导FK-BP52的信号分子之一,在HOCXA10基因敲除的小鼠细胞中,FKBP52蛋白会发生下调作用。本实验RT-PCR和Westernblotting检测结果均显示,与正常组比较,模型5、10W组组织中RAGE蛋白表达量呈现增高的趋势,HOXA10蛋白表达量呈现下降的趋势。这可能与胚胎着床有关系。p/CAF是重要的组蛋白转移酶,催化核心组蛋白的乙酰化,存在于子宫内膜的基质细胞中,促进相关基因转录。Rustandi等[18-19]研究证实,p/CAF是HOXA10
【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号:2841815

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