NGFβ/HIF-1α双基因转染表达对SD大鼠骨髓间充质干细胞生物学功能影响及安全性评价

发布时间：2025-03-17 22:16

　　目的 本文通过对NGFβ/HIF-1α双基因转染表达对SD大鼠骨髓间充质干细胞生物学功能的影响及其安全性评价的研究，为应用组织工程学方法治疗脊髓损伤奠定基础。 方法 首先，复苏SD大鼠BMSCs，采用贴壁培养法将SD大鼠BMSCs传代培养，取细胞融合率达85%以上的BMSCs用于实验研究。然后，分别构建编码NGFβ、HIF-1α表达基因的慢病毒载体，测定最佳感染复数，用最佳感染复数的携载目的基因的慢病毒载体转染BMSCs，Western blot检测基因转染后NGFβ和HIF-1α表达水平。实验共分五组：A组，空白对照组；B组，空载慢病毒组；C组，NGFβ单基因转染组；D组，HIF-1α单基因转染组；E组，NGFβ/HIF-1α双基因转染组。最后，通过透射电镜观察细胞超微结构，MTT法检测细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期，体外软琼脂集落形成实验检测细胞成瘤性，评测携载目的基因的BMSCs的生物学功能及生物安全性。数据采用SPSS19．0统计软件，方差分析比较组间差异。 结果 1、在倒置显微镜下观察，BMSCs呈贴壁样生长，培养3-5天，BMSCs的基本形态为长梭形...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1培养1d时BMSCs（×400）

图1.1培养1d时BMSCs（×400）图1.2培养3d时BMSCs（×400AB

图1.2培养3d时BMSCs（×400）

图1.1培养1d时BMSCs（×400）图1.2培养3d时BMSCs（×400AB

图2.1MOI=5、10、50、100时B组转染效率（×400）

附图：图1.1培养1d时BMSCs（×400）图1.2培养3d时BMSCs（×400）

图2.2MOI=5、10、50、100时C组转染效率（×400）

34图2.2MOI=5、10、50、100时C组转染效率（×400）注：AMOI=5BMOI=10CMOI=50DMOI=100

本文编号：4035555