膜联蛋白A2在肝肺综合症大鼠血清致肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究

发布时间：2017-06-16 04:02

  本文关键词：膜联蛋白A2在肝肺综合症大鼠血清致肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景与目的：肝肺综合症（hepatopulmonary syndrome，HPS）是慢性肝病导致肺微血管病变引起动脉血氧合障碍的一种综合病征。肺血管重塑是肺微血管病变的主要病理变化，寻找调控HPS肺血管重塑的靶蛋白是目前研究的重点。膜联蛋白A2（annexin A2，ANXA2）是钙依赖的磷脂结合蛋白超家族成员，参与调节多种细胞的分化、增殖、迁移和凋亡，在多个生命过程中发挥重要作用。本研究拟探讨ANXA2在HPS大鼠血清致肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells，PASMCs）增殖中的作用，为阐明HPS肺血管重塑的分子机制及其防治提供依据。方法：原代培养大鼠PASMCs并鉴定后，随机分为2组：对照组（C组）和HPS组，分别用正常大鼠血清培养C组PASMCs，HPS大鼠血清培养HPS组PASMCs，两组PASMCs于血清中孵育24、48、72h。采用氚-胸腺嘧啶核苷掺入法（3H-TdR）、噻唑蓝比色法（MTT）检测大鼠PASMCs增殖变化，分别用RT-PCR和western blot检测大鼠PASMCs中ANXA2mRNA及其蛋白表达含量变化；运用RNA干扰（RNAinterference，RNAi）技术将ANXA2基因沉默，观察对HPS大鼠血清致PASMCs增殖的影响，并用western blot检测ERK1/2、NF-κB磷酸化水平。结果：HPS组PASMCs在血清孵育24、48、72h的3H-TdR以及MTT检测值明显高于C组各时间点，差异具有统计学意义（P0.05），且随大鼠血清作用时间延长，HPS组PASMCs3H-TdR以及MTT检测值增加更为明显；两组均检测出ANXA2mRNA及其蛋白的表达，但与C组比较，HPS组PASMCs内ANXA2mRNA及其蛋白表达明显增加（P0.05），且随时间延长，表达量增加更明显。siRNA下调ANXA2表达后，再经HPS大鼠血清孵育，PASMCs MTT以及3H-TdR掺入量明显低于对照组（P0.05）。与C组比较，，HPS大鼠血清可致ERK1/2、NF-κB磷酸化水平明显升高（P0.05）；而下调ANXA2表达后，HPS大鼠血清致ERK1/2、NF-κB磷酸化明显低于对照组（P0.05）。结论：HPS大鼠血清可致PASMCs异常增殖；HPS大鼠血清通过ANXA2介导促增殖信号ERK1/2、NF-κB活性改变可能是PASMCs异常增殖的机制之一。
【关键词】：增殖 肺动脉平滑肌细胞 膜联蛋白A2 肝肺综合症
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-11
• 第一部分 HPS 大鼠血清对 PASMCs 增殖以及对 ANXA2 表达的影响11-28
• 材料与方法12-22
• 结果22-26
• 讨论26-28
• 第二部分 下调 PASMCsANXA2 表达实验研究28-36
• 材料与方法29-31
• 结果31-34
• 讨论34-36
• 第三部分 下调 ANXA2 表达对 HPS 大鼠血清致 PASMCs 增殖以及下游 ERK1/2、NF-κB 活性的影响36-44
• 材料与方法37-38
• 结果38-41
• 讨论41-44
• 全文结论44-45
• 参考文献45-49
• 英汉缩略词对照表49-50
• 致谢50-51
• 综述51-63
• 参考文献59-63
• 研究生期间发表的论文63-64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 倪晓光;赵平;王贵齐;;膜联蛋白A1的结构和功能及其与恶性肿瘤的关系[J];癌症进展;2010年01期

2 陶晓倩;王大勇;柳海燕;林钗英;韩雪峰;时姗姗;崔英霞;戈一峰;姚兵;;膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响[J];医学研究生学报;2010年04期

3 国斌;易斌;鲁开智;;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的研究进展[J];医学研究生学报;2010年08期

4 章蔼然;潘宁;侯颖春;;膜联蛋白A2与恶性肿瘤发展进程的关系[J];细胞生物学杂志;2008年03期

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本文编号：454308