三株A型流感病毒致小鼠肥大细胞系P815凋亡的研究

发布时间：2017-06-22 15:04

  本文关键词：三株A型流感病毒致小鼠肥大细胞系P815凋亡的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本实验室前期的研究证明,在A型流感病毒感染过程中,肥大细胞可被H5N1激活,释放活性介质,引起感染组织炎性反应,并加剧感染组织的病理损伤：抑制肥大细胞活性,可明显减轻靶器官的病理损伤,减少感染小鼠的死亡率。本研究以小鼠肥大细胞系P815为研究材料,观察了A型流感病毒感染肥大细胞后细胞凋亡的发生情况与机理。 本研究采用透射电镜观察TUNEL染色,对攻毒之后的肥大细胞进行了检测,结果证明H1N1(A/WSN/33). H5N1(A/Chicken/Henan/I/04)及H7N2(A/Chicken/Hebei/2/02)三种亚型的流感病毒均可诱导肥大细胞凋亡。采用磷脂酰丝氨酸染色法及后续的流式细胞仪分析,比较了三株不同亚型流感病毒诱导肥大细胞的凋亡比率,结果显示三株病毒诱导肥大细胞凋亡的能力为H5N1H1N1H7N2。 此外,本研究采用了Western Blot, Caspase抑制实验和磷脂酰丝氨酸染色法及后续的流式细胞仪分析,对A型流感病毒诱导肥大细胞凋亡的信号通路进行了研究。结果提示病毒主要通过线粒体介导的内源性通路诱导细胞凋亡的发生,而死亡受体介导的通路的活化在病毒诱导的细胞凋亡中比较微弱。通过对Bcl-2家族中两个促凋亡蛋白Puma及Bim的检测,我们观察到促凋亡蛋白Puma与Bim表达水平上调,这暗示着它们在A型流感病毒感染诱导肥大细胞凋亡的过程中可能发挥了重要作用。
【关键词】：A型流感病毒 细胞凋亡 肥大细胞 信号通路
【学位授予单位】：中国农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R373.13
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 目录7-9
• 插图和附表清单9-10
• ~.略词表10-12
• 第一章 流感病毒与细胞凋亡(文献综述)12-32
• 1. A型流感病毒概述12-16
• 1.1 A型流感病毒历史12-13
• 1.2 A型流感病毒结构、分类和命名13-14
• 1.3 A型流感病毒的入侵与复制14-16
• 2. 细胞凋亡16-22
• 2.1 细胞凋亡简介16
• 2.2 细胞凋亡形态学特点16-17
• 2.3 细胞凋亡的检测方法17-22
• 3. A型流感病毒与细胞凋亡通路的关系22-28
• 3.1 诱导细胞凋亡的主要信号通路22-24
• 3.2 IAV与死亡受体介导的信号通路24-25
• 3.3 IAV与RIG-I样受体介导的信号通路25-26
• 3.4 IAV与调控细胞凋亡的其它相关分子26-28
• 4. A型流感病毒与肥大细胞28-32
• 4.1 肥大细胞简介28-29
• 4.2 肥大细胞在A型流感病毒感染中的作用29-32
• 第二章 A型流感病毒感染肥大细胞模型的建立32-43
• 1. 引言32
• 2. 材料与方法32-38
• 2.1 材料32-35
• 2.2 方法35-38
• 3. 结果38-41
• 3.1 三株A型流感病毒贮存原液毒力测定38-39
• 3.2 HA检测病毒感染后细胞上清病毒血凝效价39
• 3.3 三株A型流感病毒的噬斑检测39-40
• 3.4 定量PCR检测A型流感病毒NS基因40-41
• 4. 讨论41-42
• 5. 小结42-43
• 第三章 A型流感病毒诱导肥大细胞凋亡的研究43-52
• 1. 引言43
• 2. 材料与方法43-48
• 2.1 材料43-45
• 2.2 方法45-48
• 3. 结果48-50
• 3.1 透射电镜检测细胞凋亡48
• 3.2 TUNEL检测细胞凋亡48-49
• 3.3 磷脂酰丝氨酸染色检测细胞凋亡49-50
• 4. 讨论50-51
• 5. 小结51-52
• 第四章 A型流感病毒诱导肥大细胞凋亡通路的研究52-64
• 1. 引言52
• 2. 材料与方法52-59
• 2.1 材料52-57
• 2.2 方法57-59
• 3. 结果59-62
• 3.1 Western Blot检测病毒感染后细胞凋亡通路59-61
• 3.2 凋亡抑制剂处理后磷脂酰丝氨酸染色法检测病毒感染后细胞凋亡率61
• 3.3 凋亡抑制剂处理后Western Blot检测病毒感染后细胞凋亡61-62
• 4. 讨论62-63
• 5. 小结63-64
• 第五章 结论64-66
• 参考文献66-72
• 致谢72-74
• 个人简介74

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 ;Mast Cell and Immune Inhibitory Receptors[J];Cellular & Molecular Immunology;2004年06期

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本文编号：472160