小鼠骨髓间充质干细胞Osterix基因特异siRNA的设计和沉默作用

发布时间：2017-08-07 10:15

  本文关键词：小鼠骨髓间充质干细胞Osterix基因特异siRNA的设计和沉默作用

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【摘要】：目的探讨应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性抑制骨髓间充质干细胞内Osterix基因表达,筛选高效特异性siRNA。方法根据siRNA设计原则,针对Osterix基因序列特征设计Osterix特异siRNA(1-3),转染骨髓间充质干细胞,用QPCR和Western blot方法检测siRNA对Osterix基因的抑制效果。结果 Osterix siRNA-2可有效抑制骨髓间充质干细胞中Osterix基因的表达。随siRNA-2终浓度由50 nmol/L增加到100 nmol/L及200 nmol/L,抑制效率逐渐增强(P0.05);siRNA-2以终浓度200 nmol/L转染后48 h抑制效果最强,72 h逐渐减弱,但仍明显抑制(P0.05)。结论应用RNA干扰技术可抑制骨髓间充质干细胞中Osterix基因的表达,其抑制作用具有明显的时间、浓度依赖性。
【作者单位】： 武汉市第九医院骨科;
【关键词】： RNA干扰 Osterix基因 小鼠骨髓间充质干细胞 基因沉默
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞、脂细胞、软骨细胞和肌原细胞等[1],优良的分化潜能使其可以作为组织工程研究中种子细胞的来源。Osterix基因是2002年科研人员在C2C12细胞中通过消减抑制杂交的方法分离出来的[2]。蛋白质分子量为46Ku,由428个氨基酸组成[3]。研究发现在Osteri

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本文编号：634107